禽流感病毒诊断方法的研究进展.pdfVIP

综述部分 总之，随着高致病性禽流感的疫情形势越来越复杂，防控技术研究的任务也愈加艰巨。目前的 研究重点主要集中在病原特性、遗传变异规律、繁殖传播机理、快速检测技术和安全高效疫苗等方 面。病原学研究主要是为防控药物的设计打基础；理想的检测技术应是敏感特异、简便快速、高通 量、适于现场应用，核酸等温扩增和基冈芯片技术具有良好的发展潜力；理想的疫苗应是免疫效果 好、副反应轻、能抵抗多种血清型和变异株病毒，可用于多种动物的免疫。因此一种高质量禽流感 基因工程疫苗的设计就要选择编码免疫原性好、毒力低蛋白质、相对保守的基因序列(如NP和M 蛋白)，并加以适当的修饰，还要注意载体和免疫佐剂的选择。必须充分认识到，单纯的药物和疫苗 并不是最有效的方法，只有采取综合防控措施，才能根本上控制高致病性禽流感的发生。 参考文献(略) 禽流感病毒诊断方法的研究进展 李娇1王金良2管宇2沈志强1·2 (1山东绿都生物科技有限公司滨州山东256600；2山东滨州畜牧兽医研究院滨州山东256600) 摘要禽流感是由禽流感病毒(AIv)所致的一种人畜共患急性传染性疾病，不但造成养禽业的巨大经济损失，还 对人类公共卫生安全造成威胁。因此，快速、准确的诊断技术对于禽流感的防控非常重要。近年来，主要有病原学， 血清学、分子生物学等检测技术。本文就这些方法的基本原理、检测优缺点以及应用现状进行综述，以期为禽流感 的诊断及防控提供有力的技术支持。 关键词禽流感；诊断方法；研究进展 Vims，AIV)所引起的禽类 禽流感(AviaIlInfluenza，AI)是由A型流感病毒(Avi锄Influenza 的感染或疾病综合征。该病1878年首次发生于意大利，当时称之为“鸡瘟”，现已几乎遍布世界各地。 AI可引起大多数家禽、野禽及水禽的感染，其中以鸡和火鸡最为易感，水禽被认为是流感病毒的自 innuenza 然宿主。禽流感病毒(Avian villls，AJV)最显著的生物学特征之一就是亚型众多，不同亚 型病毒之间可以通过交换某些基因片段发生基因重排，出现具有新的生物学特征的病毒，而且其抗 原变异频繁，包括由点突变引起的抗原漂移(Antigenic“ft)和不同亚型毒株同源重组产生新亚型 shift)，因此为禽流感的诊断及有效防制带来了极大的困难和挑战。 所引起的抗原转变(Antigenic 流感病毒的确切诊断依赖于病毒的分离签定，检测病毒抗体也是非常有效的间接诊断方法。因 为症状变化较大，除了疾病呈流行性外，临床诊断非常困难。因此，禽流感主要依靠实验室方法进 行确切诊断，诊断方法主要包括病原学、血清学和分子生物学三部分。 l病原学的诊断方法 1．1病毒的分离鉴定 病毒的分离鉴定是禽流感的经典诊断方法，也是世界动物卫生组织(wHO)推荐的方法。尽管 检测流感病毒的新方法不断涌现，但是病毒的分离鉴定仍是检测病原的“黄金标准”，新方法的建立 均需要用该方法验证。 通常情况下，如果病料中有病毒存在，那么传代后就具有红细胞凝集作用，若初次传代未检测 到血凝活性，可将收获的鸡胚尿囊液盲传三代，若仍不出现血凝性，则可判定为阴性。出现血凝活 方法是血凝(HA)试验，AⅣ可凝集马、骡、驴、绵羊、山羊红细胞，而NDV不能；另一方法是用 血凝抑制(HI)试验，用ND和EDs一76标准阳性血清来抑制分离病毒的血凝性，若分离病毒的血凝 性不能被ND和EDS．76的抗体所抑制而能被AI的抗体抑制，则分离病毒可能为流感病毒，可作进一 步的鉴定。 病毒的分离鉴定需要接种鸡胚或组织培养，其操作程序繁杂、费用高、实验室要求高(国家规 定必须在P3级实验室进行)、周期长(检测时间需1—3周)，使大面积应用推广受到较大限制，不能 够满足急性烈性传染病紧急疫情防制工作的需要。另外，病毒在感染过程中的不同阶段在不同的组 122 第十三次学术研讨会会议论文集 织部位中的分布和含量存在差异，因此不能保证每次采样均能分离到病毒，从而造成漏检。 1．2电镜检测技术 由于流感病毒为正粘病毒，属于形态特征性强的病毒，因而可用电镜技术或免疫电镜技术来诊 断。电镜技术快速、准确，但检验结果与样品制备技术、取病