酶联免疫法与磁微粒化学发光法检测HBV PreS1Ag的结果比较分析.docVIP

精品论文 参考文献 酶联免疫法与磁微粒化学发光法检测HBV PreS1Ag的结果比较分析 南阳市中医院 河南南阳 473000 【摘 要】本实验采用酶联免疫法（A法）与磁微粒化学发光法（B法），对128例HBsAg和HBV-DNA均阳性的标本，11例HBsAg阴性标本，分别进行PreS1Ag检测，并与常见的HBV血清标志物结果做比较分析。A法PreS1Ag检出率为79.7%，B法PreS1Ag检出率为95.3%。PreS1Ag与HBV-DNA的相关性较HBsAg更优，B法较A法敏感度高。 【关键词】酶联免疫法；磁微粒化学发光法；PreS1Ag；HBV-DNA 乙型肝炎病毒（HBV）感染可导致肝脏的炎症，称为乙型病毒肝炎，是威胁人类健康的重要传染病之一。乙型肝炎病毒前S1抗原（HBV PreS1Ag），存在于完整的乙型肝炎病毒颗粒（Dane颗粒）表面，是乙肝病毒外膜蛋白的重要组成部分，参与乙肝病毒的组装、分泌，还可识别肝细胞膜上特异性受体[1]。可作为病毒感染和复制的重要辅助指标[2-3]，本实验采用两种方法对HBV PreS1Ag进行检测，并与HBV血清标志物结果比较分析。 1 资料与方法 1.1一般资料：均来自本院就诊患者。常规抽取静脉血，分离血清置-20℃保存待检。 1.2试剂：A法为郑州安图公司ELISA双抗体夹心法试剂盒，批号为141209；B法为郑州安图磁微粒化学发光法试剂盒，批号为150209。质控血清购自中国卫生部临床检验中心。 1.3仪器：A法为上海科华公司ST-360酶标仪；B法为郑州安图公司Auto 2000化学发光分析仪。 1.4测定方法：A法用聚苯乙烯板包被抗-PreS1，与标本中的PreS1Ag结合，加入辣根过氧化物酶标记的抗-PreS1温育，洗去游离的酶标抗体，以四甲基联苯胺为底物显色，经酸终止后在450/630nm处读取吸光度（OD）值。Cut off值=2.1times;阴性对照孔平均值。 B法血清50ul放在Auto 2000化学发光分析仪的标本架上，仪器自动吸样分析。 1.5结果判断标准：A法以标本OD值与临界OD值的比值（ge;s/co）为阳性；B法用标本相对光强度与标准曲线比较计算出浓度。 1.6统计学分析：统计软件SPSS17.0对数据进行分析，各方法对比采用X2检验，Plt;0.05有统计学意义。 2 结果 2.1 A法与B法检测HBV PreS1Ag的结果（n=139）：用两种方法对这139份标本的PreS1Ag 进行测定和分析，11例HBV-DNA阴性患者，A法和B法检测PreS1Ag均为阴性。组间比较Plt;0.05，两种方法有显著统计学差异，见表1。 2.2用两种方法对不同模式HBV标志物的标本进行PreS1Ag的检测，并对PreS1Ag阳性检出率进行比较，见表2 3 讨论 在测定乙肝病毒PreS1Ag的检测方法中，A法由于操作简便、快捷、成本较低，因此应用广泛，但由于不同厂家生产的试剂有较大差异，分离结合态抗体的不确定性，以及反复洗板带来的误差，因此带来一系列误差，容易出现较高的假阴性。B法综合了磁微粒载体技术和化学发光免疫技术，使测量结果更准确、稳定，且全面实现了检测的自动化和标准化，减少了人工操作带来的误差，大幅度减少了批内、批间的误差[4]。 本实验与HBV常见血清标志物的比较显示：PreS1Ag、HbeAg、HBV-DNA有很好的相关性。而且在HbeAg（-）、抗-HVc（+/-）病例组中，B法与HBV-DNA符合率较高。提示此组患者病毒仍在复制，表明PreS1Ag在反映HBV复制方面较HbeAg更有意义。因此临床上增加PreS1Ag检测对HBV感染患者的治疗和预后可以提供有效知道，值得临床应用和推广。 参考文献： [1]张娟.乙型肝炎分子生物学诊断技术的研究发展.国外医学：临床生物化学与检验学分册，1996，17（3）：127-129 [2]姚雯颖，曹广亚，徐斌.乙肝前S1抗原与HBV血清标志物HBV-DNA的关系.中国实用医学研究杂志：2003，2（3）：364-366 [3]刘彦华，倪旭.HBV-前C区基因变异与乙肝病毒复制的相关性，河北医药：2007，29（10）：1056-1058 [4]陈慧英，张锦峰，岑小鹏，等.ELISA检测乙型肝炎HbsAg室内质控血清的试剂和使用[J].上海医学检验杂志：2010，15（4）：203-205