酶联免疫质量控制之反应方式.docVIP

精品论文 参考文献 酶联免疫质量控制之反应方式 刘昌全 宜宾县人民医院 四川 宜宾县 644600 摘要：酶联免疫的质量控制有两个要点，一个是洗涤是否充分，另一个就是反应是否充分。国内酶联免疫的传统反应方法是恒温水箱或孵箱37℃温育，由于化学发光和荧光免疫检验项目的引进而带来另一种反应方法，即室温低速振荡[1]。室温低速振荡如果能代替恒温水箱或孵箱温育，将使反应条件相对更简便、更易控制，更便于实验室间的结果比对和相互认可。 关键词：酶联免疫 质量控制 Enzyme linked immune quality control Abstract: the quality control of enzyme linked immune system has two main points. One is whether the washing is sufficient and the other is the reaction is sufficient. The traditional reaction method of the enzyme linked immune system is the constant temperature water tank or incubator 37.The temperature and low speed oscillation can be replaced by a constant temperature water tank or incubator, which will make the reaction conditions are relatively simple, more easy to control, and more convenient for laboratory results than and mutual recognition. Key words: enzyme linked immune quality control 方法：酶联免疫的反应进程包括：第一步的抗原‐抗体特异性的免疫学反应，第二步的酶化学的酶促生物放大反应。分别比较免疫反应和酶促反应在恒温水箱温育、室温低速振荡不同条件下的反应效果。 试验1： 取1份乙肝阳性血清样本，稀释成相同浓度的8份，使用HBsAg试剂盒（厦门新创）作4种不同反应阶段、不同反应条件的双杯平行试验。 方法1与方法3比较、方法2与方法4比较，反映的是恒温水箱温育、室温低速振荡对免疫反应的影响，室温低速振荡结果较优。 方法1与方法2比较、方法3与方法4比较，反映的是恒温水箱温育、室温低速振荡对酶促反应的影响，室温低速振荡结果较优。 方法1与方法4比较，反映的是恒温水箱温育、室温低速振荡对酶联免疫反应的综合影响，室温低速振荡结果整体较优。所以可以对二者作进一步的比对试验。（方法2与方法3比较，反映的是室温低速振荡对免疫反应、酶促反应的影响，以免疫反应受影响程度较大。） 试验2： 各取20份乙肝阴性血清样本、20份乙肝阳性血清样本，使用HBsAg试剂盒（厦门新创）作恒温水箱温育、室温低速振荡2种不同反应条件的平行比对试验。 恒温水箱温育、室温低速振荡不同反应条件的酶联免疫反应结果对比，室温低速振荡明显较优， 结论 酶联免疫的反应进程包括：第一步的抗原‐抗体特异性的免疫学反应，第二步的酶化学的酶促生物放大反应。影响抗原抗体反应的因素有pH、电解质、温度和振动搅拌等。合适的温度促使分子运动加快，可加快抗原与抗体结合反应的速度；一般以15 ~ 40℃为宜，最适温度是37℃[2]。振动与搅拌能加强反应物的相互撞击，可促进抗原抗体反应的速度。在液相酶促反应中，温度、振动与搅拌的影响也是相同的方式。室温低速振荡法因此具有理论基础。室温低速振荡法与恒温水箱温育法的酶联免疫试验相比，定性结果一致，且显色效果更加明显、稳定，可提高酶联免疫试验的质量并促进其定量检测的发展[3]。室温低速振荡法的室温反应条件相对更简便，更易实行、统一。在此条件下进行室内质控，效果更佳；室间结果对比，则因反应条件更一致、更统一，更具可比性，更利于实验室间的结果互认。 参考文献 [1] 周守勤,孔斌,张???青,贾晓群,杜晓娟,李玉敏. Grubbs法在酶联免疫法室内质控中探讨[J]. 临床和实验医学杂志. 2011,7(22):1002-1003. [2] 王靖,高书钰,张娜. 探讨改变酶联免疫吸附试验条件对HBsAg室内质