电化学发光免疫法与放射免疫法检测肿瘤标记物CEA的比较.docVIP

精品论文 参考文献 电化学发光免疫法与放射免疫法检测肿瘤标记物CEA的比较 孙杰 李金花 王晓坤（大连港医院检验科 辽宁大连 116013） 【中图分类号】R444【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）20-0053-02 【摘要】目的 比较放射免疫法与电化学发光免疫法两种方法的检测效果，了解两种方法的检测特点及两者对癌胚抗原（CEA）检测结果的影响。方法 同时用电化学发光免疫法和放射免疫分析法对15份血清标本的CEA含量进行检测，应用SPSS V11.5软件进行统计学比较和分析。结果 两种方法检测结果无差异（Pgt;0.05），其相关性良好，但稳定性、灵敏度、精密度、检测速度等电化学发光免疫法均显著优于放射免疫法。结论 电化学发光免疫法是一种工作效率高，检测结果稳定、可靠、灵敏度高的检测方法。 【关键词】放射免疫分析法 电化学发光免疫法 癌胚抗原 临床上癌胚抗原（CEA）测定主要用于结、直肠癌的诊断、判断肿瘤分期和病变程度、监测治疗和预报复发等[1，2]，因而通过检测血液中癌胚抗原的含量，对动态监测跟踪结、直肠癌的病情变化和观察治疗效果有重要的临床价值。临床实验室用于检测CEA的方法主要有放射免疫分析（RIA），酶联免疫分析，化学发光免疫分析，电化学发光免疫分析（EcLIA）等检测方法，其中放射免疫分析(RIA)由于敏感度高、特异性强、密度精并可测定小分子量和大分子量物质，所以多年来一直在医学检验中被广泛应用。而电化学发光免疫分析测量技术，具有更高灵敏度、稳定性和无放射性污染等优点，超过了上述传统的检测方法。为进一步了解电化学发光免疫法和放射免疫法的特点，我们首先对电化学发光免疫法和放射免疫分析法做了线性比较，回收实验，精密度实验，并采用对15份合格血清标本的CEA含量进行对比实验检测，并对检测结果进行了统计分析和比较，旨在进一步了解电化学发光免疫分析法与放射免疫分析法的特点及这两种方法对结、直肠癌检出率的影响。 1 材料与方法 1.1标本来源 从大连港医院住院病人和门诊送检血清标本中获得，如果标本超出仪器检测范围或者明显异常的标本不予统计，最后经过筛选，获得15份合格血清标本。 1.2仪器与试剂 全自动电化学发光免疫分析系统Elecsys2010及其配套试剂，购自罗氏公司。试剂包括：（1）M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，8ml。粒子浓度0.72mg/ml。含防腐剂。（2）R1：生物素化的抗CEA单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml，3.0mg/L磷酸缓冲液100mmol/LpH6.0，含防腐剂。（3）R2：Ru(bpy)3+标记的抗CEA单克隆抗体（黑盖），1瓶，8ml，浓度4.0mg/L磷酸缓冲液100mmol/LpH6.5，含防腐剂。GC-911r放射免疫计数器由中国科学技术大学科技实业总公司中佳光电仪器公司提供。放射免疫分析试剂盒由北京市福瑞生物工程公司提供。 1.3方法 空腹取血2毫升经4000r/min离心10min，取血清备用，按照仪器操作手册及实验室相关要求，用配套试剂做线性、对比性、回收率、精密度测试。 2 结果 2.1线性实验 将标准液按0，5，10，20，40，80ug/L倍比稀释，分别用EcLIA和RIA 法进行线性范围测试，结果显示，RIA法在CEA浓度达40ug/L时出现偏离，而EcLIA法在CEA浓度超过40ug/L仍具有良好的线性。 2.2对比实验 分别用EcLIA法和RIA法对15份受检血清标本进行定量分析，结果表明，两法差异无显著性(Pgt;0.05)。 2.3回收实验 取不同浓度的混合血清，CEA浓度为：13.21，15.17，47.728分别加入不同已知浓度的定值血清，分别用EcLIA法和RIA法测得的回收率分别为98.8%(97.2%～102.7%)和96.2%(90.7%～109.5%)。 2.4精密度实验 用上述两法对低、中、高值，质控品分别进行精密度实验。每份样品分别测定20次，计算x，s求批内CV值。每日测定1次，连续测定20d，计算x，s，求批间CV值。结果表明，电化学发光的重复性优于放射免疫分析法，见表1。 表1 RIA和EcLIA法的批内和批间CV值（%） 3 讨论 EcLI是继放射免疫法、酶免疫法、荧光免疫法、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术，是电化学发光和免疫测定相结合的产物。本次论文从线性关系，对比关系，回收实验，以及精密度这四个方面对EcLI和放射免疫分析法进行了比较，其结果表明，电化学发光免疫法优于放射免