王香江（莆田学院）医学生物学：13临本5-细菌感染的检查和防治.pptVIP

* * * * * * * * 莆 田 学 院 医 学 院2013级临床医学本科课程 医学生物学（4学分） 授课教师：王香江 Tel 教研室在实验楼301室 教材选用 李凡主编《医学微生物学》人卫版 第七章 细菌感染的检查方法 与防治原则 第七章 细菌感染的检查方法与防治原则 第一节 细菌感染的实验室诊断 第二节 细菌感染的特异性预防 第三节 细菌感染的治疗原则 教学目的： 1.掌握临床标本的采集和运送原则。 2.掌握细菌感染的治疗原则。 3.熟悉细菌的形态学检查及细菌感染的特异性预 防。 致病菌的检验程序 直接涂片镜检 涂片镜检 生化反应 标本→分离培养→可疑菌落 血清学鉴定 ↘ ↑ 药敏试验 增菌 动物试验 第一节 细菌感染的实验室诊断 第一节 细菌感染的实验室诊断 细菌学诊断、血清学诊断 一.临床标本的采集和送检：应遵循下列原则 （1）早期采集：应在疾病早期和使用抗菌药物之前采集 标本； （2）无菌采集：严格执行无菌操作，尽量避免患者正常 菌群或外界环境中杂菌污染标本； （3）采集适当标本：根据病原菌在患者不同病期的体内 分布和排出部位，采集不同的标本。尽可能采集病 变明显部位的材料； 第一节 细菌感染的实验室诊断 （4）采集双份血清：检查特异性的抗体（IgG）时，应采 集急性期和恢复期双份血清，恢复期为急性期效价4 倍或4倍以上才有诊断价值。 （5）尽快送检：标本必须新鲜，采集后尽快送检。若不能立 即送检，应将标本置于特殊的转运培养基中，低温保存 （但某些细菌要求保温：淋病奈瑟菌等）。 （6）做好标记：在相应化验单上详细填写标本种类、检验目 的和临床诊断，以保证各种环节准确无误。 第一节 细菌感染的实验室诊断 二.细菌的检测 （一）.细菌形态学检查：不染色和染色 * 直接涂片染色镜检：简便快速价廉 - 直接观察细菌的形态、大小、排列方式和染色特点。 - 凡在形态和染色性上有特征的细菌，有助于初步诊断。 - 为临床检验常用，但敏感性不如分离培养法。 （二）.细菌分离培养与鉴定：需时较久 - 确诊细菌感染性疾病的金标准，并有助于选用抗菌药物和评价疗效。 - 根据细菌所需要的营养、生长条件、菌落特征等可作初步鉴别。 - 确诊还需对纯培养物进行形态特征、生化试验和血清学试验、动物实验、药敏实验鉴定。 普通染色镜检 大肠杆菌（荧光抗体染色） 疏螺旋体（荧光抗体染色） 荧光抗体染色镜检 【生长现象的观察】 固体培养基 ：菌落、菌苔形成 菌落的特点：大小、颜色、形状、边缘、隆起度、 表面、湿度、透明度、溶血环等 液体培养基 出现均匀混浊生长、沉淀生长或出现菌膜。 半固体培养基 有鞭毛的细菌（如大肠杆菌）沿穿刺线向周围扩 散生长，穿刺线模糊； 无鞭毛的细菌（如痢疾杆菌）只沿穿刺线生长， 穿刺线清晰，周围培养基透明。 第一节 细菌感染的实验室诊断 * 生化试验： - 对菌体形态、染色性、菌落特征相同或相似的细菌鉴定尤为重要。 - 现代临床细菌学已普遍采用微量、快速、半自动化或自动化的细菌生化鉴定和细菌药敏分析系统。 * 血清学试验： - 用含有已知特异性抗体的免疫血清，可快速准确地检出临床标本中极微量的致病菌特异性抗原。 - 常用方法有凝集试验、免疫荧光技术、ELISA等。 * 动物实验：一般不作为常规细菌学诊断 - 可进行致病菌的分离与鉴定、细菌毒力的检测等。 - 常用实验动物有小鼠、豚鼠、家兔等。 - 接种途径有注射、灌胃等。 细菌鉴定试剂盒 淋球菌（SPA协同凝集试验） 沙门菌（玻片凝集试验） 新生隐球菌（乳胶凝集试验） 血清学鉴定 动物实验 全自动细菌鉴定、药敏系统 第一节 细菌感染的实验室诊断 （三）细菌抗原的检测 利用已知的特异性抗体检测未知的细菌抗原成份，可直接使用临床标本或在细菌培养后进行。如玻片凝集实验等 （四)细菌核酸的检测 * 基因诊断技术：特异性强、敏感性高、快速 1.PCR技术：还有RT-PCR、定量实时荧光PCR等 2.核酸杂交技术：原理 - 液相杂交、固相杂交（原位杂交、斑点杂交、Southern印迹〔DNA测定〕、Nort