无精子症因子区部分缺失在男性不育人群中的意义.pdfVIP

临床合理用药2014年 3月第7卷第 3A期 ChinJofClinicalRationalDmgUse，March2014．Vo1．7No．3A ·121· · 临 床 研 究 · 无精子症因子区部分缺失在男性不育人群中的意义 孙碧珂，李淑英，张庆波，张晔，陈初光 摘【 要】 目的 探讨无精子症因子 a(AZFa)区部分缺失男性不育人群中的意义。方法 选取男性不育436 例作为观察组，另选取正常可育男性作为对照组。2组均采用Chelex法提取2组人群的DNA，采用多重荧光PCR法 检测AZFa区部分缺失。结果 436例患者中存在至少一种AZF区域缺失54例 (12．4％)。携带AZFa完全缺失患者 8例 ，占1．8％。其中AZFa单独缺失3例(0．7％)，所有AZFa区完全缺失者均表现为USP9Y、DBY、sY84及sY86位点 同时缺失。结论 由于AZFa区部分缺失的稀缺性给评估DBY或us IY基因缺失对生精障碍的临床相关性造成了 很大障碍，现已报道的病例信息较少且临床症状各异，所以收集较大量的阳性样品，并集 中分析基因型与表型的相关 性，对临床研究仍有较大意义。 【关键词】 男性不育；Y染色体微缺失；AZFa部分缺失 【中图分类号】 R698 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674—3296(2014)03A一0121—03 Y染色体微缺失是已知的引起男性不育的重要遗传学因 扩增及检测：除检测样本外 ，加做女性对照与空对照。选用 素之一。随着卵细胞胞浆内精子注射 (ICSI)等辅助生育技术 ABI9700PCR仪进行扩增，选用 ABI3730xl测序仪通过毛细 的迅速发展，Y染色体无精子症因子(AZF)区缺失引起了越来 管电泳技术实现对扩增产物的检测。扩增及检测条件参照试 越多的关注与重视。在常见的Y染色体缺失中，AZFa区缺失 剂盒说明书。 的临床症状最为严重。除AZFa区完全缺失外，近几年不断有 1．3 统计学方法 使用 Genemapper3．2分析软件处理3730xl 报道指出存在AZFa部分缺失现象。但 AZFa部分缺失与男性 检测数据，分析并判断样本缺失类型。相关性计算，选择 SPSS 不育是否存在直接的临床相关性仍存在争议。本文选取 636 13．0统计软件进行数据处理。计数资料以率(％)表示，组间 例 (436例男性不育患者，200例精液正常可育男性为对照)， 比较采用 检验，P0．05为差异有统计学意义。 通过多重荧光PCR检测技术 ，筛选 AZFa区部分缺失样本 ，并 2 结 果 讨论其与男性不育人群中的相关性。 436例患者 中存在至少一种 AZF区域缺 失 54例 1 资料与方法 (12．4％)；携带AZFa完全缺失患者 8例 (1．8％)；AZFa单独 1．1 一般资料 选用男性不育436例作为观察组，其中包括 缺失 3例 (0．7％)。所有 AZFa区完全缺失者均表现为 血卡样本236例 ，血液样本200例；无精症 180例，少精症 134 USURY、sY86、DBY、sY84位点同时缺失，与 AZFa两端 HERV 例，严重少精症 122例；均来 自于国家人口与计划生育研究所。 发生重组导致的缺失模式相符。未发现 AZFa区部分缺失样 按照WHO精液检验标准，连续3次进行精液分析，3次精液离 本。正常样本分型图见图1，AZFa区完全缺失见分型图见图 心后沉淀涂片未见精子者为无精症 ，精子计数5×10。／ml者 2。另外 ，该试剂盒可以通过 sY84的峰位置判断是否存在 为严重少精症，精子计数(5～20)×10。／ml者为少精症。另选 sY84引物是否存在 SNP，从而避免AZFa区部分缺失假阳性的 取正常可育男性200例作为对照组，均至少有一个确定存在亲 出现，见图3。初筛共得到sY84一SNP样本3O例 (6．9％)，所 缘关系的子代，精子数正常。 有初筛30例样本经测序验证 ，结果与分型一致，见图4。 1．2 方法 3 讨