农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系研究.pdfVIP

安徽农业科学 ，JournalofAnhuiA ．Sci．2013，41(31)：12257—12261 责任编辑 石金友 责任校对 况玲玲 农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系研究 朱小彬，于一帆，葛会敏，梁建生，陈云 (扬州大学生物科学与技术学院，江苏扬州225009) 摘要 [目的]研究农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系。[方法]以甘蓝型油菜为试验材料，以组织培养为基础 。以下胚轴为 外植体，以统计出愈率和 出苗率为指标 ，探讨农杆菌介导的遗传再生苗形成的影响因素。以G蛋白信号转导调节蛋白(RGS)为例，建立 稳定的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系。[结果]种子经10％NaC10灭菌20mim后播种 ，基底用1／2MS配琼脂，直径6em的培养罐50 粒 ，光照充足(200panol／m ·s)，成功获得 RGSi干扰表达阳性株系。[结论]试验以下胚轴为外植体，系统研究了甘蓝型油菜组织培养 过程中各种因素对再生苗形成的影响，建立了有效的下胚轴遗传再生体系。 关键词 甘蓝型油莱；组织培养；下胚轴 ；再生苗 中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2013)31—12257—05 StudiesonAgrobacterium-mediatedHypocotyleRegenerativeSystem inBrassicanapus ZHUXiao-binetal (CollegeofBioscienceandBiotechnology，YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu225009) Abstract [Objective]TostudyAgrobacterium—mediatedhypocotyleregenerativesysteminBrassicanapus．[Method]WithBrasswanapusas testmaterial，tissuecultureasbasis，hypocotyleasexplant，callusinductionrateandemergencerateasindexes，theinfluencingfactorsof Agrobacterium—mediatedgeneticregenerationseedlingswerediscussed．WiththeinterferedgeneoftheregulatorsofGproteinsignaling(RGS proteins)asexample，thestableregenerativesysteminBrassicanapuswasestablished．IResultlSowingafter10％NaC10sterilizationfor20 min，1／2MSmixedwithagarasbasement，diameter6emculturetank50，adequateillumination(20o~moL／m ·s)，RGSiinterferenceposi． tivestrainswassuccessfullyobtained．[Conclusion]Withhypocotyleasexplants，effectsofvariousfactorsonregenerativeseedlingswere studiedintissuecultureofBrassicanapus，theeffectivehypocotyleregenerativesystem wasestablished． Keywords Brassicanapus；Tissueculture；Hypocotyle；Regenerativeseedling 油菜 (Brassicanapus)是仅次于大豆 的第 2大植物油脂 讨论农杆菌介导的油菜下胚轴遗传转化过程中的可能问题 来源，我国为世界油菜主产 国，占据世界重要地位，面积、产 以及通过相应的单因子试验对比来优化转化过程，以期为完 量均居世界第一。专家们长期努力的目标集中在油菜的育 善油菜兼具稳定性和可重复性的良好遗传再生体系提供一 种和品种改良方面，常规的方法是有性杂交，但是存在着选育 些参考和方向，并为运用基因工程技术改良油菜奠定基础。 年限过长、远缘杂交不亲和和亲本材料匮乏等一系列问题。后