药物对牛蛙淋巴细胞毒副作用的研究.pdfVIP

水产科技情报 2010，37(5) 243 doi：10．3969／j．issn．1001—1994．2010．05．009 药物对牛蛙淋巴细胞毒副作用的研究 邓时铭 肖克宇 蒋国民 (1湖南省水产科学研究所，长沙 410153 2湖南农业大学动物科技学院，长沙 410128) 摘 要：将牛蛙T、B淋巴细胞悬液分别与 1000、500和250 g／mL环磷酰胺、庆大霉素和链霉素药液置于 22℃和28℃下共同培养48h，显微镜下统计细胞死亡率和细胞毒，以探讨三种药物对牛蛙淋巴细胞的毒 副作用。结果显示：同温度 、不同浓度的环磷酰胺对牛蛙淋巴细胞的毒副作用差异不显著；相同浓度、不同 温度条件下，环磷酰胺的毒副作用差异极显著，该药对T淋巴细胞的毒副作用随着温度的升高显著增强 ， 细胞死亡率显著上升，细胞毒增加，B淋巴细胞的死亡率和细胞毒则显著下降；庆大霉素对牛蛙T、B淋巴 细胞的毒副作用随着使用浓度和温度的上升而增强，细胞死亡率上升，细胞毒增加；链霉素对 T、B淋巴细 胞的毒副作用随着温度的上升而增强 ，对B淋巴细胞的毒副作用尤为显著。 关键词：环磷酰胺 ；庆大霉素；链霉素；牛蛙；淋巴细胞；毒副作用 牛蛙(Ranacatesbeiana)是一种两栖类经济动 要的理论意义和实用价值 。 物，营养价值高，能强壮体质，治疗多种疾病 ， 其皮肤分泌物具有广泛而复杂的生理和药理活 1材料与方法 性 J。随着养殖规模的扩大，疾病的增多，养殖 1．1试验材料 者越来越依靠药物来进行牛蛙疾病的防治。但由 牛蛙购于长沙市马王堆菜市场 ，体质健壮，雌 于药物本身存在一定的毒副作用，加之不科学的 雄兼有。环磷酰胺、庆大霉素、链霉素分别由上海 使用导致药效降低，毒副作用增强，使牛蛙产品质 华联制药有限公司、河南辅仁怀庆堂制药有限公 量下降，甚至危害到人类健康，同时也严重制约了 司、大连美罗大药厂生产，购 白药店。 养殖业 的可持续发展 。 1．2淋 巴细胞悬液的配置 环磷酰胺、庆大霉素和链霉素是药物防治时 从牛蛙心脏取血，以肝素抗凝 ，用淋巴细胞分 常用的免疫制剂和抗炎类药物，对病原微生物有 离液分离，取白细胞层，用 RPMI1640细胞培养液 一 定的抑制或杀伤作用，起到改善或缓解疾病状 和 5．00％小牛血清配制淋巴细胞悬液。 态的作用 J。然而在使用过程中，药物在达到 1．3T、B淋 巴细胞的分离 药效的同时，是否对机体本身有一定的毒副作用? 将淋巴细胞悬液放入尼龙棉柱内，封闭棉柱， 笔者 以牛蛙淋 巴细胞为对象，研究在不同条件下 置于37℃的水浴锅中孵育30rain。打开棉柱，倒 药物对机体淋巴细胞的杀伤及毒性作用，探索药 出培养液，并用 RPMI1640细胞培养液洗涤两次， 物对机体的免疫调节和毒副作用，为正确选择并 收之为T淋巴细胞。将 RPMI1640细胞培养液和 科学合理使用药物提供一些参考。这一研究对保 5．00％小牛血清的混合液加入棉柱内，插入针栓 障养蛙业和水产养殖业的持续发展也有着十分重 用力挤压，可收集B淋巴细胞 ，调整细胞浓度为 收稿 日期：2010—04—20 作者简介：邓时铭 (1974一)，女，硕士研究生，主要从事水生动物病害与免疫方面的研究。 通讯作者：肖克宇(1954一)男，教授，主要从事水产医学研究。