恶性肿瘤流式细胞测量术国际统一新标准.pdfVIP

2， 《． 乙 l】 F 1 J · 209· ~1994年8月 第21卷第 d期 恶性肿瘤流式细胞测量术国际统一新标准 皮 4-弓 · 上海第二医科大学附属瑞金医院(200025) 李正生}综述 郁宝铭 王瑞年审校 一 f ， △ 摘要 根据。|田胞DNA含量测量术统一标准国体学术鲁议”主旨t综台出应用FCM的一般堆且1一 包括标奉采集和选用、样品制奋和染色方法、怔器操作中应注意的问题度数据或DNA tt方囤分析的依 据。还就膀肫、前列腺、结直聊、乳腺度血液系肿瘤DNA含量的特点度其临床应用价值诈一甚鳍·矗后 根据此次鲁议的要求，对将来文献报导所应遵循的十条原则标准进行归纳，以期借鉴。 近20年来，流式细胞测量术(FCM)应用 各种肿瘤的手术切除后的新鲜或冰冻标 于各种恶性肿瘤DNA含量(包括DNA倍性和 本、活检标本及石蜡包埋标本均适用，血液系肿 S期)测定的大量研究，确证肿瘤细胞DNA含 瘤可直接由采血或骨髓穿刺获得。膀胱冲洗物 量能充分反映肿瘤的生物学特性，并可充分应 也可用于测定DNA含量，但排出尿则不宜，因 用于预测肿瘤病人的预后和对药物治疗的疗效 其细胞常有变性，且细胞数量太少。由于实体瘤 评价等方面。但目前国际国内关于肿瘤细胞 标本中可能有多个 DNA异倍体细胞亚群存 FCM方面的报导仍缺乏共识，没有统一标准， 在，故取样时至少应包括瘤体的3个不同区域。 以至实验结果重复性很差。这给互相交流及进 新鲜或冰冻组织适宜作多参数分析，而存档的 一 步深入研究带来很大困难。 石蜡包埋组织则可用于肿瘤病人的回顾性研 】992年 】0月，美国国立癌症研究所组织 究。所有肿瘤标本都应经病理医生检查，且经组 召开了“细胞 DNA测量术统一标准国际学术 织学或细胞学检查核实。 会议” ，还专门就几种常见肿瘤包括膀胱、前 2、样品制备和染色 列腺、结直肠、乳腺及血液系等肿瘤的 DNA 不同组织来源的肿瘤标本应该采用不同的 PCM制定了统一的准则和标准一 。本文拟就这 细胞或核分离技术。总体上讲，可用以下几种物 些准则和标准及其在几种肿瘤中的临床应用要 质或方法处理：酶(如胰蛋白酶、胃蛋白酶、链霉 点和各肿瘤DNA含量特点作一综述，提供今 蛋白酶)、化学物质(如EDTA，EGTA)、去污剂 后开展这方面工作的参考。 (如VP—d 0，T riton)等分离处理细胞，或用机械 一 、 FCM一般性准则 法分离细胞。要求所分离得的单细胞悬液中含 1、标本采集 有尽可能少的细胞团块和碎片。实体瘤标本中 8 Johnson P e E a1．Mol Cell B】oJ．『993I J3：1456～ Id63 17 Fak deh S S eI a-．EMBo J．1991l1 0，1565~ 1569 9 Y0n