反相高效液相色谱法制备松果菊苷标准品.pdfVIP

第19卷第3期 色 谱 Vn1．19 No．3 2001年5月 CHINESE JOURNAL OF CHROM 堑 ：HY May 2001 反相高效液相色谱法制备松果菊苷标准品 雷 厉 2， 宋志宏 ， 屠鹏飞 ， 吴立军 ， 陈发奎 (1．北京大学药学院天然药物学系，北京 100083；2．沈阳药科jVq：00N．~．，辽宁沈阳110015) 摘要：利用反相制备高教液相色谱结合溶剂萃取、 孔吸附树脂柱色谱和葡聚糖凝胶LFI 20柱色谱方法，从管花肉 苁蓉的乙醇提取物中纯化制备了苯乙醇苷类化合物——橙果菊苷的标准品，纯度达到9896以上：方法操作简便， 重现性好，可用于松果菊苷及其他苯乙醇苷类化合物的大量制备。 关键词：反相制备高教液相色谱法；肉苁蓉；苯乙醇苷类；松果菊苷 中图分类号：0658 文献标识码：A 文章编号：1000 8713(2001)03—0200—03 D101大孔吸附树脂柱(南开大学化工厂)；葡聚糖凝 1 前言 胶LH-20(Pharmacia公司)；聚酰胺薄膜(黄岩市四 肉苁蓉(Herl~astanches)为常用的传统朴益 青生化材料厂)；显色剂：质量分数为5％的三氯化 中药．具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效 大量 铁乙醇溶液；色谱纯乙腈(Fisher Chemicals公司)； 研究表明其有效成分为苯乙醇苷类化合物 色谱纯甲醇(天津西华特种试剂厂)；其他试剂均为 (phenylethanoid glycosides，PhGs) 该类化合物有 分析纯。 明显提高记忆功能、抗衰老、助阳等作用l1 J。 2．2 色谱条件 松果菊苷是肉苁蓉中含量较高的一种苯乙醇苷 半制备型HPLC：Phenomenex Krornasio C18柱 类化合物，在以管花肉苁蓉 Cistanche tubulosa (10 i13／-fl i d．×250 rllii1，5 tun)；流动相为乙腈一体积 (Schenk)R．Wight]为原料制成的国家级二类新药 分数为1％的甲酸水溶液(体积比为18：82)；流速为 — — 苯乙醇总苷中其质量分数高达48％。因此进 2．5 mL／min；检测波长为331 nm；进样体积为120 一 步研究松果菊苷单体的活性和体内药物学过程具 L；柱温为室温；检测灵敏度为4．000 AUFS。 有重要的意义。由于目前国内外还未见有松果菊苷 分析型HPLC：Waters Spherimrb oDs柱(4．6 标准品出售，因此，有必要对其进行分离和纯化，以 n1T11 i d．×250 rrlnl，5 tun)；流动相为乙腈一体积分数 满足实验的需要。 为1％的甲酸水溶液(体积比为16：84)；流速为l 松果菊苷极性很大，分子中所含的4个酚羟基 mL／min；检测波长为331 nm；进样体积为10 ；柱 易与色谱固定相的硅胶分子中的硅醇基作用，使得 温为室温；检测灵敏度为1．000 AUFS。 色谱峰产生拖尾，因此制备其纯品的困难较大。本 2．3 样品处理 文利用半制备高效液相色谱结合大孔吸附树脂和葡 将管花肉苁蓉(产地为新疆和田)的干燥肉质茎 聚糖凝胶LH-20柱色谱技术从管花肉苁蓉的乙醇 1O kg粉碎后，用体积分数为95％的乙醇回流提取3 提取物中分离纯化出松果菊苷：经核磁共振波谱鉴 次，每次2 h 将提取液合并，减压浓缩至膏状．加少 定为松