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乳腺癌中血管内皮生长因子受体KDR表达及其意义 　 作者：董伟 刘友富 张加满 吴志宏 宋斌 宋景春 【摘要】 目的 研究乳腺癌中血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor2, VEGFR2）KDR的表达情况及其与微血管密度（microvessel density，MVD）关系。方法 对98例乳腺癌患者的病理标本应用CD34， KDR分别进行免疫组化染色，双盲法计数热点内血管测定MVD，并进行统计学分析。结果 乳腺癌KDR在血管周围的肿瘤细胞质呈较强阳性表达，在部分血管内皮细胞质内表达呈弱阳性，KDR表达与MVD有统计学意义（Plt;0.05）。结论 KDR在乳腺癌细胞的高度表达可能参与乳腺癌的发病机制，为乳腺癌的治疗提供新的思路。 【关键词】 乳腺癌 血管内皮生长因子受体 微血管密度 　　【Abstract】 Objective To explore the expression of vascular endothelial growth factor receptor KDR , and the relation between KDR and microvessel density(MVD). Methods CD34 and KDR were assayed with immunohistochemistry in the specimen from 98 breast cancer patients ,double blind method was carried out to assay the MVD with hot spots and results were analyzed statistically. Results KDR was strongly positive in breast cancer cells around vessels , and weekly positive in vascular smooth muscle cells. Conclusions High expression of KDR may be related to breast cancer. 　　【Key words】 breast cancer vascular endothelial growth factor receptor microvessel density(MVD) 　　实体肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤间质中血管的新生，许多血管生成因子在肿瘤中均有表达,介导血管新生。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是其中效力最强的因子之一，它可直接或间接地参与血管新生的每一个过程，可诱导内皮细胞短暂的钙浓度升高、形态改变、细胞分裂及细胞运动，影响内皮细胞的基因表达，降解基底膜，促进血管生成，增加血管的通透性［１］。目前已证明，KDR是VEGFⅡ型受体，亲和力较高，具有受体型酪氨酸激酶活性，主要表达在内皮细胞。VEGF是通过作用于细胞上的特异性受体而发挥其生物学活性的，在脑胶质瘤、脑膜瘤等多种肿瘤组织中ＫＤＲ的表达上调［２］。一般认为，ＫＤＲ可特异性地表达于肿瘤的血管内皮细胞，但有关其在乳腺癌中的表达目前尚无定论。本文旨在研究KDR在乳腺癌中表达情况。 　　1 材料和方法 　　1.1 标本来源 　　为1990年6月至2005年4月期间，本院病理科保存的乳腺癌蜡块标本，均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，连续切片(厚4μｍ)。病例共98例，患者年龄25～72岁(平均47岁)，术前均未接受过化疗或放疗；淋巴结转移56例，无淋巴结转移42例；肿瘤直径1～12 cm。仪器、试剂：兔抗人KDR蛋白多克隆抗体为美国Santa Craz Biotechnology Inc产品，兔抗人CD34多克隆抗体、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。 　　1.2 方法 　　(1)免疫组化实验：切片常规脱蜡，30mL/L H2O2 10 min灭活内源性过氧化物酶，微波修复，正常山羊血清封闭，抗体工作浓度1∶100，滴加KDR多克隆抗体 4℃过夜，依次滴加生物素化羊抗兔IgG、SABC、DAB显色，苏木素复染，脱水，透明，封片；以ＰＢＳ代替第1抗体作为阴性对照，阳性对照采用已知的ＫＤＲ阳性的标本切片，胞核或胞浆染成棕黄色为阳性。(2)图像分析：用多功能真彩色病理分析系统，分别测定肿瘤细胞和血管内皮细胞质表达的平均吸光度值，取其均值作为各自KDR蛋白表达的相对含量。(3)MVD测定：按Weidner方法［３］，低倍镜在肿瘤中心区寻找热点，400倍镜下由2位病理科医生按双盲法分别