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乳腺癌外周血 Midkine mRNA表达及其临床意义探究 　 作者：顾禾　韩霜　陈守华　张丽丽 【摘要】 目的：检测乳腺癌患者血清中期因子(Midkine，MK)mRNA的表达，探讨乳腺癌患者血清中MKmRNA表达的意义。方法： 应用RT-PCR方法检测42例乳腺癌患者血清中MKmRNA的表达，并与25例良性乳腺疾病患者血清对照。结果：42例乳腺癌患者中78.57％（33/42）外周血可检测出MKmRNA，而对照组中只有8.70%（2/33）阳性表达（χ2=31.283 ，P＜0.001）。在乳腺癌患者中，MKmRNA的表达与浸润程度、淋巴转移有关（P＜0.05），与肿瘤直径的大小、肿瘤分化等级无关（P＞0.05）。结论：乳腺癌患者血清中MKmRNA的表达与肿瘤的生成、发展及转移、浸润程度有关，有望成为判断乳腺癌转移、复发的重要指标。 【关键词】 乳腺肿瘤·中期因子·基因·淋巴转移 【ABSTRACT】 0bjective：To detect the expression of Midkine(MK)mRNA in serum of patients with breast cancer and evaluate its significance．Methods：The expression of MKmRNA in 42 cases of breast cancer and 25 cases of benign breast diseases were detected in blood samples using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)．Results：Among the 42 cases of breast cancer,33 cases（78.57％）were MKmRNA positive, while only 2 positive cases in benign breast diseases（χ2=31.283，Plt;0.001）.There was significantly correlations between its expression and infiltration and lymph node metastasis （Plt;0.05），but tumor size and differentiation degree were unrelated(Pgt;0.05).Conclusion：MKmRNA plays an important role in the tumorigenesis, progression,metastasis and infiltration of breast cancer. 【KEY WORDS】 Breast tumor·Midkine· Gene·Lymph node metastasis　　乳腺癌是我国女性最常见的恶性肿瘤之一。乳腺肿瘤的生长是个长期过程，往往在明确诊断时已出现了远处的微转移，探讨如何早期检测乳腺癌的转移是当前研究的热点之一。必威体育精装版研究发现，肝素结合性生长因子中期因子（midkine,MK）在乳腺癌中的高表达是促进肿瘤生长、发展的重要因素，并且与肿瘤的浸润转移关系密切［1］。本研究采用RT-PCR方法检测乳腺癌患者外周血清MK mRNA的表达，探讨其在乳腺癌发生过程的临床意义。 1　资料与方法 1.1　一般资料　收集山东大学附属千佛山医院甲状腺乳腺外科2006年7月―2007年7月乳腺癌患者42例，均为女性，年龄28～79岁，中位年龄46岁。所有病例均按照美国癌症联合委员会乳腺癌TNM分期（2006年版）进行分类，其中Ⅰ期18例，Ⅱ期13例，Ⅲ期9例，Ⅳ期2例；组织学类型：浸润性导管癌32例，导管内癌7例，鳞状细胞癌1例，髓样癌1例，黏液腺癌1例；腋窝淋巴结转移31例，无转移11例。另选25例同期来我院检查治疗的良性乳腺疾病患者为对照组。所有病例均为病理组织学检查确诊，采血前均未接受化学治疗和放射治疗。 1.2　试剂与仪器　主要仪器和试剂包括淋巴细胞分离液和焦碳酸二乙酯（南京生兴生物技术有限公司），TRIZOL （Promega 公司） ，RT-PCR试剂盒 （Promega 公司），基因扩增仪 （TC－25/H，杭州博日科技有限公司）。引物设计合成参照相关文献及NCBI检索信息[2]，由上海生物工程公司提供人工合成。MK引物序列:上游 5′-ATGCAGCACCGAGGCTTCCT-3′，下游 5′-ATCCAGGCTTGGCGTCTAGT-3′； β-actin引物序列：上游 5′-CCCTGGACTTCGAGCAAGAGAT-3′