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β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成实验探究 　 作者：谭江琳，彭旭，袁顺宗，马兵，张小容，胡小红，罗高兴，吴军 【摘要】 目的 探讨β4整合素结合蛋白(ITGB4BP)对成纤维细胞胞外基质生成的调控作用。方法 分别构建、包装能在哺乳动物细胞中促进和抑制ITGB4BP表达的腺病毒表达载体pAdEasyITGB4BPEGFP和慢病毒表达载体LentivirusFIVH1/U6copGFPITGB4BPRNAi，经筛选鉴定有效后，分别感染人正常皮肤成纤维细胞和增生性瘢痕(HTS)成纤维细胞，利用ELISA检测细胞培养上清内基质金属蛋白酶(MMP9)、转化生长因子β1(TGFβ1)和Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的表达情况。结果 正常皮肤成纤维细胞内ITGB4BP高表达后，引起MMP9、TGFβ1和collagen Ⅰ表达降低;反之HTS成纤维细胞内ITGB4BP表达抑制后，MMP9、TGFβ1和collagen Ⅰ表达增高。结论 ITGB7BP对MMP9、TGFβ1和collagen Ⅰ表达具有重要调节功能。提示ITGB4BP可能具有抗纤维化的重要功能，为下一步深入探讨HTS的形成机制提供了重要依据。 【关键词】 β4整合素结合蛋白;腺病毒;慢病毒;成纤维细胞 　　Abstract: Objective To identify the effect of ITGB4BP(integrin beta 4 binding protein) on the production of extracellular matrix in fibroblasts.Methods The recombinant adenovirus pAdEasyITGB4BPEGFP and LentivirusFIVH1/U6copGFPITGB4BPRNAi were constructed,packaged and amplified in packaging cells,respectively.The primary cultured fibroblast from human normal skin was infected by the recombinant adenovirus pAdEasyITGB4BPEGFP,while the fibroblast isolated from human hypertrophic scar was infected by the LentivirusFIVH1/U6copGFPITGB4BPRNAi.The expression of MMP9,TGFβ1,and collagen I in cell culture supernatant was detected by ELISA.Results Upregulated expression of ITGB4BP in human normal skin fibroblast could inhibit the expression of MMP9,TGFβ1,and collagenⅠ,whereas downregulated expression of ITGB4BP could promote the expression of MMP9,TGFβ1,and collagenⅠ in human hypertrophic scar fibroblast.Conclusion ITGB4BP could play an important negative role in the process of production of MMP9,TGFβ1,and collagenⅠ.Our data suggest ITGB4BP is a new potential target in fibrosis. 　　Key words:ITGB4BP;adenovirus;lentivirus;fibroblast 　　增生性瘢痕(hypertrophic scar，HTS)是机体组织受到热力或者其它形式创伤后的一种不良结局，组织学表现为成纤维细胞活化导致胶原和其它细胞外基质(extracellular matrix，ECM)分子过度沉积[1]。在引起HTS的细胞和分子机制的广泛研究中，目前公认的关键事件为处于静息状态的成纤维细胞在转化生长因子β1(transforming growth factorβ1，TGFβ1)和机械应力的作用下发生表型转化，变为表达α平滑肌肌动蛋白(smooth muscle cell αactin,αSMA)为标志物的