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半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表
半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表 作者:韦鹏涯 浦洪琴 韦星 宾晓芸 李朝敢 【摘要】 目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D. Don extract, SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg·L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg·L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果 与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P﹤0.001),细胞凋亡率明显上升(P﹤0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(Plt;0.01或Plt;0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(Plt;0.01或Plt;0.05)。结论 SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。 【关键词】 半枝莲 SMMC-7721细胞 细胞凋亡 Bcl-2; Survivin Caspase-3 Abstract:ObjectiveTo explore the apoptosis-inducing effect of Scutellaria barbata D. Don extract(SBE)and the expression of apoptosis associated proteins Bcl-2, Survivin and Caspase-3 on human liver cancer SMMC-7721 cells. MethodsSMMC-7721 cells were treated with 2.5, 5 and 10 mg·L-1 SBE for 48h, and the cells were treated with 2.5mg·L-1 DDP as positive control. The inhibitory rat was evaluated by MTT assay. The apoptotic rate was determined by flow cytometry. The expression of Bcl-2, Survivin and Caspase-3 proteins were detected by two-step immunohistochemical staining.ResultsCompared with control group, the inhibitory rate was increased obviously(Plt;0.001), the apoptotic rate was increased markedly(Plt;0.01), the expression of Caspase-3 protein was increased significantly(Plt;0.01 or Plt;0.05), while Bcl-2 and Survivin proteins were decreased markedly (Plt;0.01 or Plt;0.05) in SBE groups. ConclusionSBE can induce apoptosis of liver cancer SMMC-7721 cells. The molecular mechanism might be related to up-regulating the expression of Caspase-3 and down-regulating the expression of Bcl-2 and Survivin apoptosis related proteins. Key words:Scutellaria barbata D. Don; SMMC-7721 cells; Apoptosis 半枝莲Scutellaria barbata D. Don,SB属于唇形科植物,临床上常用于肝癌、肺癌、胃癌和鼻咽癌等多种癌症防治,但具体的抗癌机制尚不明确。研究发现,半枝莲提取物(SBE)能诱导白血病K562细胞凋亡,其作用机制可能与Caspase3的表达升高和活化有关[1];SBE可诱导人肝癌QGY-7701细胞凋亡,并能上调Bax和下调Bcl-2的表达[2];SBE还通过上调凋亡相关基因蛋白Fas表达,促进人肝癌He
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