六味地黄汤对雌性致衰模型小鼠生殖器官影响实验探究.docVIP

六味地黄汤对雌性致衰模型小鼠生殖器官影响实验探究 　【摘要】 目的观察六味地黄汤（LW）对雌性致衰小鼠生殖器官的影响。方法小鼠颈背部皮下注射D - 半乳糖建立衰老模型，同时给予六味地黄汤、己烯雌酚治疗，然后检测六味地黄汤对β-内啡肽（β-EP）、血清雌激素（E2）、孕激素（P）含量以及对卵巢、子宫形态学的影响。结果六味地黄汤能够提高β-内啡肽含量，增加小鼠阴道脱落细胞涂片内角化上皮细胞和表层细胞，卵巢重量增加。结论六味地黄汤具有雌激素样作用，可能通过调理下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO)的功能，使卵巢功能恢复。 【关键词】 六味地黄汤； 卵巢早衰 　　Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Liuwei Dihuang Tang on causing senility to ovaria of mice. MethodsTo establish senility model through subcutaneous injection of D-galactogen into the neck and back of mice, which were subsequently treated with Liuwei Dihuang Tang and ethylene cyclohexne. Meanwhile, to observe the effects of Liuwei Dihuang Tang on the content of β-endorphin, sero-estrogen and progestogen, and on ovaria and uterine histomorphology. ResultsLiuwei Dihuang Tang could improve the content of β-endorphin, increase the cornified and epithelial cell and epidermal cell in the vaginal exfoliated cell smear of mice. ConclusionLiuwei Dihuang Tang serves the same function as estrogen, which restores the normal functioning of ovaria by regulating the workings of subthalamus-hypophysis-ovarian axis. 　　Key words：Liuwei Dihuang Tang; POF 　　六味地黄汤（LW）是中医滋补肾阴的代表方剂。由熟地、山茱萸、山药、茯苓、泽泻、牡丹皮6味药组成,其特点是长于三阴(肝脾肾)并补而以补肾为主的方剂。长期临床观察此方有抗衰老功能，但从未看到抗衰老实验室对小鼠生殖器官细胞、形态结构研究的报道。本研究通过把六味地黄汤用于实验小鼠活体内对卵巢、子宫组织细胞、形态结构观察，从而为六味地黄汤对卵巢早衰分子生物学研究提供较可靠的实验依据。 　　卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)是指卵巢功能提前衰退，表现为妇女40岁之前非生理性的月经停止，伴有潮热、原发及继发不孕、全身和生殖器萎缩，卵泡刺激素(follicular stimulating homone,FSH)升高(FSHgt;40IU/L)及E2下降。目前病理机制不甚清楚，而建立POF动物模型对其病因的基础研究以及指导临床的诊断和治疗有重要意义。由于半乳糖血症患者常表现为原发性闭经或卵巢早衰，且有报道动物体内的半乳糖增多可引起类似与卵巢早衰的改变，故本课题组采用D -半乳糖建立小鼠卵巢早衰动物模型［1］，通过观察LW对小鼠下丘脑－垂体－卵巢轴（HPO）的调节作用及对小鼠生殖器官形态学影响，探讨LW对POF的治疗机制，指导临床诊断和治疗。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物 　　雌性昆明种小鼠60只，8～12周龄，体质量25 ～30 g，由河南省南阳医专实验动物中心提供。饲养环境安静，温度25～35℃，相对湿度为50％～60％，自由进食、水。 　　1.2 药品与试剂 　　六味地黄汤草药药材购于河南省南阳市医药公司，由南阳医学高等专科学校药理教研室按比例组方 ，经煎制、过滤、浓缩为1 g/ml (以生药汁) 六味地黄汤口服液，高压灭菌，O℃冰箱保存备用。D - 半乳糖为上海恒信制药厂产品，批号 用灭菌生理盐水配制成50 g/L,0℃冰箱保存备用。乙烯雌酚由上海衡山药业有限公司生产，批号为000201。雌二醇（E2）放射免疫药盒购自天津德普公司；孕