六味地黄汤生物制剂对肾阴虚小鼠脾T淋巴细胞亚群影响.docVIP

六味地黄汤生物制剂对肾阴虚小鼠脾T淋巴细胞亚群影响 　 作者：胡旭光，臧建伟，唐春萍，杨超燕，赵越 【摘要】 　　目的观察六味地黄汤生物制剂对实验肾阴虚小鼠脾T淋巴细胞亚群的影响，并与传统六味地黄汤进行比较。方法用甲状腺素和利血平建立肾阴虚小鼠模型，模型小鼠在服用药物1周后，称体重和计算脾脏指数，采用流式细胞仪测定脾脏T淋巴细胞亚群表达。结果六味地黄汤生物制剂对肾阴虚模型小鼠脾T淋巴细胞亚群CD4/ CD8比例有提高作用，与传统六味地黄汤组比较存在显著性差异（Plt;0.05）。结论六味地黄汤生物制剂对肾阴虚模型小鼠T淋巴细胞亚群具有显著的调节作用，可提高机体的细胞免疫功能，其作用优于传统的六味地黄汤。 【关键词】 六味地黄汤生物制剂； 肾阴虚； T淋巴细胞亚群 　　Abstract：ObjectiveTo study the effect of Liuweidihuangtang Biological preparation (PSB) on T cell subsets in kidney-yin deficiency mice.MethodsNIH mice were orally given 150 mg/kg dosage of thyroxin , and 1mg/kg dosage of reserpine, once a day for continuing seven days. Five groups of mice were set up as PSB-LW group, LW group , PSB group, normal group and model group. The changes of body and spleen indexes were measured and the expression of CD4 and CD8 on T cell surface in spleen cells were detected by flow cytometry.ResultsLiuweidihuangtang biological preparation could increase the body weight and spleen index, raised the ratio of CD4/CD8 of T cell subsets in spleen.ConclusionLiuweidihuangtang biological preparation shows obvious immune regulation effect and is superior to the traditional Liuweidihuangtang. 　　Key words：Liuweidihuangtang Biological preparation; Kinney-yin Deficiency; T cell subset 　　六味地黄汤是祖国医学治疗肾阴虚的经典名方，由熟地、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮、茯苓6味中药组成。现代药理学研究表明，该方具有增强免疫、抗衰老、调节内分泌、抗肿瘤等作用。光合细菌为厌氧光合菌纲，其营养成分丰富，具有增强抗病力，调节机体免疫活性等功能。本实验室首次采用光合细菌代谢六味地黄汤，制成新型的六味地黄汤生物制剂，并在临床实践中取得了满意的疗效。本课题前期研究表明，六味地黄汤生物制剂在治疗肾阴虚证、抗衰老、调节非特异免疫、特异性细胞免疫（Ｔ细胞产生迟发性变态反应）作用方面优于传统的六味地黄汤［1］。在此基础上研究六味地黄汤生物制剂对脾T淋巴细胞亚群的影响，并与传统六味地黄汤的作用相比较，为开发新中药生物制剂提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 药物与试剂 　　甲状腺素，德州生宝制药有限公司，批号060112；利血平， 广东邦民制药厂有限公司，批号061119； Rat anti mouse CD3-APC，Rat anti mouse CD4-FITC，Rat anti mouse CD8-PE， AbD serotec，批 　　1.2 六味地黄汤（LW）的制备熟地、山药、山茱萸、泽泻、丹皮、茯苓按处方的比例（8∶4∶4∶3∶3∶3）配药。加8倍量的水，文火煎煮1.5 h，滤过，药渣再加6倍量的水煎煮1.5 h，滤过。合并滤液，浓缩至0.5 g/ml，备用。 　　1.3 六味地黄汤生物制剂的制备（PSB-LW）按上述方法制备的六味地黄汤经自然发酵后，按一定比例加入光合细菌，于光照培养箱中培养，6个月后即得。所制备的药液含生药材量同上，活菌数为1×109个/ml。 　　1.4 动物NIH种小鼠，体质量(20±2)g，雌雄各半，由广东省实验