六种杀菌剂对当归褐斑病菌室内毒力测定.docVIP

六种杀菌剂对当归褐斑病菌室内毒力测定 　 作者：王艳，陈秀蓉，王惠珍，朱田田，夏月红 【摘要】 目的 测定噁醚唑、丙森锌等6种药剂对当归褐斑病菌的室内毒力，从而为当归褐斑病的防治提供药剂筛选依据。方法 采用生长速率法和抑制孢子萌发法。结果 生长速率法测定结果为：10 %噁醚唑、70 %丙森锌抑菌效果均在95 %以上，EC50分别为0.0004 mg/L和1.1025 mg/L，50 %多菌灵最差，抑菌效果不及26 %。孢子萌发法测定结果为：10 %噁醚唑1800倍和70 %丙森锌800倍抑菌率分别为74.76 %和89.91 %，EC50分别为0.2460 mg/L和0.0527 mg/L，50 %多菌灵抑制作用亦最低。结论 10 %噁醚唑、70 %丙森锌对当归褐斑病菌菌丝生长和孢子萌发抑制效果最好，可杀得和甲基硫菌灵次之，20 %二氯异氰尿酸钠和50 %多菌灵抑制效果最差。 【关键词】 当归；褐斑病；室内毒力；测定 当归是伞形科当归属植物Angelica sinensis(Oliv) Diels. 的地下根及根茎，有补血、活血、调经、润燥等功用[1]，临床用量大，出口量大。随着栽培年限的增加，病原的逐渐积累，当归病害发生日趋严重，成为制约其产量和品质的一大因素。当归褐斑病是当归的主要叶部病害[2]，据调查，岷县药材示范园及城部大田褐斑病发病率100 %，严重度3级，渭源、嶂县发病率87 %～95 %，严重度3～7级。为了寻求经济、安全、有效的新型防治药剂，2006年至2007年我们对噁咪唑、丙森锌等6种药剂作了室内毒力测定，试验结果如下。 1 材料与方法 1.1 供试药剂 10 %噁醚唑（世高）水分散颗粒剂（瑞士先正达作物保护有限公司）；53.8 %可杀得干悬浮剂（美国固信公司）；20 %二氯异氰尿酸钠（菜菌清）可溶性粉剂（威海韩孚生化农药有限公司）；50 %多菌灵磺酸盐可湿性粉剂（运城绿康实业有限公司）；70 % 丙森锌（安泰生）可湿性粉剂（拜耳作物科学公司）；50 %甲基硫菌灵（瑞托）悬浮剂（深圳市瑞得丰农药有限公司）；以蒸馏水作对照（CK）。 1.2 筛选供试培养基 选用当归煎汁(100 g叶片+1000 mL水煮+17 g琼脂)、菠菜煎汁(含100 g/L鲜叶)、燕麦片、PDA、PSA、VBC、PYA、WA、Richard、PDA+2.5 ‰脯氨酸、Czapek培养基、葡萄糖酵母浸膏培养基、玉米粉蔗糖培养基[3]共13种供试培养基，将直径7 mm的菌块分别接种于供试培养基上，每处理3皿，25 ℃下培养。筛选出菌丝生长较快的培养基。 1.3 不同药剂对菌落生长的影响 采用生长速率法[4]观察。 1.3.1 供试菌种 当归褐斑病菌采自甘肃岷县病株，症状典型，经镜检病原菌为褐斑病菌（Septoria sp.），经PDA分离，24 ℃培养，菌龄7 d后纯化，4 ℃下PDA斜面保存，实验时PDA平板扩繁，7 d后用7㎜打孔器切取菌饼备用。 1.3.2 菌液配制和带药培养基制备 按试验要求称取药剂，配成不同质量浓度的母液，分别吸取10 mL母液加入到90 mL、温度为50～60 ℃的PDA培养基中，摇匀，配成不同质量浓度的药剂培养基平板。待培养基凝固后，接入直径为7㎜的菌饼，置于培养基中央，重复4次，24 ℃下培养，对照为空白PDA培养基。 1.3.3 测定结果 接菌后每隔4 d用十字交叉法测定菌落直径，直到对照菌落满皿。计算不同质量浓度供试药剂对当归褐斑病菌的抑制率，应用DPS软件求出各单剂毒力回归方程、EC50。 抑制率(%)=(对照菌落直径－处理菌落直径)/对照菌落直径×100 ％ 1.4 不同药剂对孢子萌发的抑制作用 1.4.1 供试菌种 将PDA斜面试管中保存的当归褐斑病菌在PDA+2.5 ‰脯氨酸平板上扩繁，待菌落表面大量产生分生孢子器和分生孢子后，检查孢子萌发情况，再进行试验。 1.4.2 配制孢子悬浮液 挑取培养基上分生孢子器，加少量不同质量浓度的药液，压碎孢子器，释放出分生孢子，再加药液使孢子浓度适中，即每视野（10×10倍）中有15～20个孢子，以便孢子萌发和观察。对照用无菌水。 　 1.4.3 镜检 将孢子悬浮液制片，25 ℃下悬滴培养，分别于4，8，12，24，36，48，60，72 h后检查孢子萌发率，检查的孢子数不少于300个，需20个视野，每视野孢子数不多于20个，计算不同药剂对孢子萌发的抑制率。 2 结果与分析 2.1 供试培养基筛选 见表1。结果表明，PDA、PSA、脯氨酸的菌落生长显著且极显著地高于其他培养基；PDA+2.5 ‰脯氨酸的产孢量极显著地高于其他培养基。故室内药剂毒力测定选用PDA+2.5 ‰脯氨酸培养基。表1 不同培养基对菌丝生