六月青含药血清对HepG2.2.15细胞系HBsAg及HBeAg表达影响.docVIP

六月青含药血清对HepG2.2.15细胞系HBsAg及HBeAg表达影响 　 作者：林兴　黄权芳　张士军　刘曦　黄仁彬 【摘要】 目的观察六月青（Liuyueqing，LYQ）含药血清的体外抗乙型肝炎病毒的作用。方法以MTT法检测药物在体外对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用，采用酶联免疫法（ELISA法）检测HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg、HBeAg的滴度。结果LYQ含药血清对HepG2.2.15细胞50%生长抑制率的给药剂量为11.56 g·(kg·d)-1；而对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg 50%生长抑制率的给药剂量为0.178 g· (kg·d)-1，其治疗指数（TI）为64.94；另外，LYQ含药血清对HBeAg抑制作用不明显。结论LYQ含药血清在体外有显著的抗HBV的作用，且毒性较低。 【关键词】 六月青含药血清； HepG2.2.15细胞； HBsAg； HBeAg 　　Abstract：ObjectiveTo observe the effect of the serum containing Liuyueqing (LYQ) on the expression of HBsAg and HBeAg in HepG2.2.15 cells. MethodsThe toxicity of the serum containing LYQ on HepG2.2.15 cells was detected by means of MTT. The inhibitory effects of the serum containing LYQ on the excreation of HBsAg and HBeAg in HePG 2.2.15 cells were evaluated with method of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).ResultsThe dose which the serum containing LYQ could inhibit 50% HepG2.2.15 cells was 11.56 g. (kg.d)-1. The dose which the serum containing LYQ could inhibit 50% HBsAg was 0.178g. (kg.d)-1, and its treatment index (TI) on HBsAg was 64.94. The inhibitory effect of the serum containing LYQ on HBeAg was not obvious. ConclusionThe serum containing LYQ can inhibit HBV significantly in vitro， and it is a low toxic drug. 　　Key words：Serum containing Liuyueqing； HepG2.2.15 cell； HBsAg； HBeAg 六月青（Liuyueqing，LYQ）系爵床科（Acanthaceae）植物肖鸡笼（顶花马兰）Taraphochlamys affinis (Gr iff) Bremekhu (Strobilanthes affinis (Griff) Y.C.Tang)的干燥地上部分［1］。六月青是复方六月雪（CLYX）主要成分之一，本课题组前期研究表明，CLYX具有明显地抗HBV［2，3］和保护急性化学性肝损伤的作用［4］。本研究以转染有HBV DNA的HepG2.2.15为模型，采用中药血清药理学方法，观察LYQ含药血清对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达的影响，并初步探讨其作用机制，为筛选出复方六月雪中抗HBV主要活性部位提供实验依据。 　　1 材料 HBsAg（乙型肝炎表面抗原）和HBeAg（乙型肝炎E抗原）酶联免疫检测试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司）；HepG2.2.15细胞株，购自北京医科大学第一附属医院病毒研究所，本室自行传代，定期用G418（一种筛选抗生素）筛选；六月青水提物，由广西医科大学药理学教研室和广西医学科学实验中心自行提取。阿昔洛韦（Aciclovir　ACV）：湖南迪诺制药有限公司医药工业研究所产品，批号:RPMI 1640培养基（美国Gibco公司，批号13200-035）；小牛血清（美国Gibco公司，批号16000-036）；G418（美国Sigma公司，批号108321-42）。 　　2 方法 　　2.1 LYQ含药血清的制备 　　3月龄Wistar大鼠70只，随机分为7组