HPLC法同时测定冷冻保鲜冬虫夏草中尿苷和腺苷.pdfVIP

2012年10月 中成药 October2012 第34卷第10期 ChineseTraditionalPatentMedicine V01．34No．10 、HPLC法同时测定冷冻保鲜冬虫夏草中尿苷和腺苷 郑永彪1， 汪晓娟2， 韩晓萍1 (1．青海省食品药品检验所，青海西宁810016；2．青海省制药厂，青海西宁810003) Waters mm× 摘要：目的建立冷冻保鲜冬虫夏草中尿苷和腺苷的HPLC测定方法。方法 sunfire色谱柱(4．6 250 nm。结果 mm，4．6斗m)；流动相系统为乙腈和水的比例和体积流量的梯度洗脱程序；柱温35℃；检测波长260 94—0．0494 尿苷和腺苷的线性范围分别为0．0340～0．340峭、0．004 lag；平均加样回收率分别为98．70％(RSD为 0．48％)、97．39％(RSD为1．6％)。结论该方法简便快捷、准确精密、重复性好，能用于冷冻保鲜冬虫夏草中腺 苷和尿苷的同时测定。 关键词：HPLC；冷冻保鲜；冬虫夏草；尿苷；腺苷 中图分类号：R927．2 文献标志码：B 文章编号：1001—1528(2012)10-2043-03 冬虫夏草是我国著名的珍贵中药，为麦角菌科真菌冬 2方法与结果 2．1 mill× sinensis(BerK．)Sace．寄生在蝙蝠娥科色谱条件‘441 色谱柱为Waterssuniire(250 虫夏草菌Cordyceps 昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体…；主要含多种氨 4．6mln，5斗m)；以水为流动相A，以乙腈为流动相B，按 基酸、核苷类(腺苷、尿苷、鸟苷)、冬虫夏草甾醇、糖 表1进行梯度洗脱；检测波长为260砌；柱温35℃；理论 醇类(13．谷甾醇、麦角甾醇、D-甘露醇)、脂肪酸、酯、塔板数按尿苷峰计算应不得低于3000。 烷烃等成分口J。 表1 梯度洗脱顺序 冬虫夏草干燥品收载于《中国药典》2010年版一部， 标准中有性状和高效液相色谱法测定腺苷，规定腺苷质量 分数不得低于0．010％【31；冷冻保鲜冬虫夏草系新采挖的 冬虫夏草除去似纤维状的附着物及泥土等杂质，快速进行 冲洗、清洁和甩干，然后冷冻、密封贮藏，为青海南英雪 线王冬虫夏草生物科技有限开发的新型加工品。前期预实 验表明，在同一色谱条件下能同时对尿苷和腺苷进行定量 2．2对照品溶液的制备分别精密称取尿苷对照品20mg 测定，且在冷冻保鲜冬虫夏草中，尿苷的含有量远高于腺 和腺苷对照品2rag，置于100mL量瓶中，加水溶解并定容 苷，10批样品的分析结果显示尿苷含有量约为腺苷的5倍 至刻度，摇匀，制得每1mL约含尿苷20雌、腺苷2峭的 以上，故为有效全面地控制药材质量，体现中药整体用药 混合对照品溶液。 的物质基础的优越型，本研究建立了冷冻保鲜冬虫夏草中 2．3供试品溶液的制备取本品(自然晾干，并同步测定 腺苷和尿苷同时测定的HPLC方法，该法简便可行，精确水分)粉末0．2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 甲醇50 可控，可用于冷冻保鲜冬虫夏草的质量控制。 mL，称质量，超声提取45rain(250W，40KHz)， 1仪器与材料 取出，放冷至室温，再称定质量，用甲醇补足减失的质量， 1．1仪器