植物组织培养实验中相关的问题答案.docVIP

1.为什么顶端分生组织没有病毒，生长的好？ 病毒在寄生植物体内随维管束系统转移，在茎尖分生组织中没有维管束系统，病毒运动困难，其移动速度落后于茎尖生长速度，导致顶端分生组织附近病毒浓度低，甚至不带病毒。、①在植物体内，病毒是通过维管束系统移动的，分生组织不存在维管束系统。 ②病毒在细胞间移动的另一个途径是通过胞间连丝移动，速度较慢，难以赶上茎尖分裂旺盛的分生细胞。 ③分裂旺盛的分生细胞代谢活性强，使病毒无法复制。 2.超净工作台的工作原理？ 将室内空气经粗过滤器初滤,由离心风机压入静压箱,再经过高效空气过滤器精滤,由此送出的洁净气流从一定的均匀的断面风速通过无菌区,从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境植物在光合作用后合成的碳水化合物一般以蔗糖和淀粉形式储存，蔗糖可以储存也方便转运，且植物利用蔗糖的系统很完善，因此培养基用蔗糖 （4）适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素浓度，或者适当增加培养基中的Ca2+、Mg、Mn、K、P、Fe、Zn、Cu元素含量，降低N和Cl元素比例，尤其是降低氨态氮浓度，提高硝态氮含量； （5）增加自然光照或控制温度，通过高、低温处理防治玻璃化； （6）在培养基中添加间苯三酚、根皮苷、多效唑、矮壮素等添加物。 褐变包括酶促褐变和非酶促褐变，目前认为植物组织培养中的褐变主要是由酶促褐变引起的。酶促褐变必须具有酶、底物和氧3个条件。 由于PPO是一种含铜离子的蛋白质，因此，寻找良好的抗褐变剂可从3个方面人手：(1)用将Cu络合掉使酶失活的物质，如植酸(PA)和乙二胺四乙酸钠盐(EDTA)等；(2)加入与酶蛋白和底物的结合部位能够结合的酶抑制剂，从而抑制醌类的产生；(3)加人能减少酚类或使醌类还原的物质，如活性碳（Ac）、抗坏血酸（Vc）、聚乙烯吡咯烷酮等。由于不同物种的PPO存在着性质上的差异，适宜不同植物抗褐变剂也会有所不同。从理论上讲，酶促褐变可以通过以下3种方法加以抑制：(1)除去引起氧化的物质——氧；(2)捕捉或减少聚合反应的中间物；(3)抑制有关的酶。 目前已在许多植物组织培养中发现有褐变现象，尤以木本植物组织培养中褐变严重。褐变现象主要发生在外植体，外植体的部位不同，取材时期不同，褐变程度亦不同，如油棕用幼嫩器官或组织，胚等作外植体进行培养，褐变较轻，而用高度分化的叶片作外植体，接种后很容易褐变。 选择适当的外植体进行预处理之后，选择适宜的培养基，在黑暗或弱光下进行培养，并在培养基中加入活性碳可以防止细胞褐变的发生和发展；在外植体接种后1～2天既转移到新鲜培养基上，使细胞在褐化之前及时转移可以大大减轻或避免褐化。