分子生物学习题课件.pptVIP

经过测序分析，欲克隆的一段DNA序列如下：; 一段从E.coli中分离出来的DNA单链序列为：5-GTAGCCTACCCATAGG-3 (1)DNA复制时，另一条单链的序列；(2)假设mRNA是由这段DNA单链的互补链作为模板转录而来，mRNA的序列怎样？(3)如果转译从mRNA的5端开始，将得到什么样的多肽(假设并不需要起始密码子)？当tRNAAla离开核糖体后，核糖体将结合什么样的tRNA？当Ala的氨基形成肽键后，如果有化学键断裂，是什么键? tRNAAla又将怎样？(4)这个RNA可编码多少种不同的肽？如果以另一条DNA单链作为模板，还会得到相同的肽吗？(5)假设这条DNA链像(2)中所说的那样被转录，但不知道用哪个可读框。请判断这个DNA是来自一个基因的头部？中部？还是尾部？;答：（1）5 -CCTATGGGTAGGCTAC- 3 （2）5 -GUAGCCUACCCAUAGG- 3 （3）如果从RNA的5段开始翻译，合成出来的蛋白质应为Val-Ala-Tyr-Pro(VAYP)。只有在Ala和Tyr 见的肽键形成后，tRNAAla才会离开核糖体。这样，在tRNAAla离开后，与核糖体结合的下一个tRNA为tRNAPro。当Ala的氨基形成肽键，Val和tRNAVal间的酯键就会断裂，tRNAVal离开核糖体，同时tRNAAla从A位移到P位。 （4）因为有3种不同的可读框，所以这个段RNA可编码3个不同的肽。在第二个读码框，第一个密码子是终止密码子UAG，但是，随后的密码子可被翻译。 （5）由于没有AUG甚至GUG，这个序列不可能来自一个基因编码区的起始部分。如果用第一个或第二个可读框，它可能来自基因的末端；如果用第三个可读框，它可能来自基因的中部。; 大肠杆菌在含有葡萄糖的培养基中长势良好，当将其接种到只含有乳糖的培养基上时，起初大肠杆菌的长势很弱，但接种几代之后该菌株又恢复其良好长势。请运用相关知识解释这一现象。 ;答：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶难以与其结合。 CAP的存在（功能）：能显著提高酶与??动子结合常数。主要表现以下二方面：CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向，以便与-10区结合，起到取代-35区功能的作用。CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合，从而提高与其特定启动子结合的概率。; 下图为人类基因的各部分结构，请结合所学知识写出图中A—O字母所代表的具体内容。;答：A：转录区域 B：下游区域 C：上游区域 D：模板链（或反义链、非编码链） E：有意链（或编码链） F：外显子 G：内含子 H：ATG I：起始点 J：启动子（TATA盒） K：上游增强子 L：TAA M：多聚A位点 N：终止点 O：下游增强子;现分离了一段DNA，含有编码多肽的基因的前几个密码子，该片段的序列组成如下：5′-CGCAGGATCAGTCGATG TCCTGTG-3′3′-GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC-5′回答以下问题并作说明。 1）哪一条链为反义链？哪一条链为有意链？ 2）mRNA的顺序是什么？并请标出第二个密码子的位置。 3）此mRNA能形成二级结构吗？若能，请写出此结构。 4）翻译从哪里开始？朝哪个方向进行？ 5）此DNA最可能是从原核细胞还是真核细胞中分离的？为什么？; 假定有一种大肠杆菌，其甲硫氨酸操纵元只由衰减子机制调控而没有阻遏蛋白。在这种操纵元模型中，甲硫氨酸衰减子同大肠杆菌的色氨酸衰减子机制十分类似，在mRNA链上衰减子的部分序列如下：;答：（1）组成型表达UGA：因为斜体A缺失后会引起移框突变，由原来的AUG AUG，等等变为UGA UGA等等。UGA是终止密码子，所以衰减子不能继续翻译，结构基因可继续转录。 （2）Metˉ：当斜体A及带下划线的A都缺失后，同样会引起移框突变，由原来的AUG AUG，等等变为GAU GAU，等等，GAU是天冬氨酸密码子，这样，即使在培养基中甲硫氨酸的含量很低，衰减子序列的翻译也会继续下去，操纵元的结构基因