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不同干燥方式对石榴皮提取液抑菌效果影响探究
不同干燥方式对石榴皮提取液抑菌效果影响探究摘 要:以新鲜石榴皮为原料,经过晒干、室温干燥、烘箱50℃干燥、烘箱105℃干燥、微波加热干燥等2种类型、5种不同方式干燥后制作提取液,研究提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌抑菌效果的影响。结果表明:5种方式干燥后的提取液均有较好的抑菌作用;对比后,微波加热干燥抑菌效果最佳。
关键词:石榴皮;干燥方式;抑菌效果
石榴( Pomegranate)又名若榴、丹若、天浆,属石榴科石榴属落叶灌木或小乔木,是一种药食两用植物[1]。石榴皮占石榴总重的20%~30%,是常用的中药,其性味甘、酸、温、涩而无毒,可以治疗多种疾病 [2]。深入研究石榴皮生物活性物质的类别,研究提取物中活性单体的抑菌效果以及加工、处理方式对石榴皮生物活性物质的影响,已成为开发新型石榴保健品和药品的关键课题[3-4]。本文以石榴皮为原料,研究2种类型、5种干燥方式的抑菌效果,确定最佳干燥方式,以期对现代医药企业的实际生产提供一点参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
石榴皮:以凉山特产店购买的颜色光亮,颗粒饱满,无疤痕,无碰伤的新鲜好果自行制备;肉汤蛋白胨培养基:自制;金黄色葡萄球菌种、大肠杆菌种、蛋白胨、牛肉膏、氢氧化钠(AR)、氯化钠(AR)、琼脂、无菌蒸馏水:由西昌学院轻化工程学院实验室提供。
1.2 试验方法
1.2.1 样品制备。原料预处理,将新鲜石榴去籽,收集石榴皮,平均分成5份,用以下5种干燥方式进行干燥制样。A烘箱干燥(105℃)样:将样品5置于立式电热鼓风干燥箱内,温度调节至105℃,干燥至恒重;B晒干样:将样品2放在室外阳光下,干燥至恒重;C烘箱干燥(50℃)样:将样品4置于立式电热鼓风干燥箱内,调节温度至50℃,干燥至恒重;D微波加热干燥样:将样品3先置于微波炉内,调节温度加热3~5min 后,转入立式电热鼓风干燥箱内,温度调节至50℃,干燥至恒重;E室温干燥样:将样品1放在室内通风处,干燥至恒重。
取上述5种干燥至恒重的样品,倒入粉碎机中,用60目筛过筛,制得5种不同方式干燥的石榴皮细粉,备用。
1.2.2 提取液制备。以无菌蒸馏水为提取剂,温度为50℃,提取时间为1h的优化提取条件对石榴皮浸提物进行提取[5-8]。
精密称定5种石榴皮粉末各0.096g,分别置于三角瓶中,加蒸馏水100ml,不断搅拌、摇匀,充分溶解后,抽滤,定容至100ml棕色容量瓶中。即得浓度0.96mg/ml(注:浓度指干石榴皮粉质量与溶剂体积之比)的5种石榴皮提取液,密封保存,备用。
1.2.3 抑菌圈直径测定。参照韩文瑜等[9]的方法:制备培养基,制备菌液,制备含药纸片。
试验操作:在超净台上将灭菌后的培养基倒入平皿内,每个约20ml,待培养基冷凝后,将菌液均匀涂抹于营养琼脂平板表面,制成含菌平板。室温2~5min后,平铺药物纸片6片(设置1片空白对照),将盖好平板盖子放入培养箱中37℃培养18~24h后,测量各药敏片的抑菌圈直径(mm)。测5次求平均值。按此方法测定其余4种提取液。
2 结果与分析
测定抑菌圈直径。抑菌圈直径越大,抑菌效果越显著。抑菌圈直径>10mm,具有显著的抑菌效果[10]。同样浓度的5种干燥方式的石榴皮提取液抑菌圈直径测定结果见表1、表2。
由表1和表2可知,与空白对照相比,不同方式干燥的石榴皮提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径均>10mm,对2种菌都有较好的抑制作用;并且可知抑菌圈直径大小关系为:微波加热干燥>烘箱50℃干燥>烘箱105℃干燥>室温干燥>晒干;显著性分析两表数据,在α=0.05水平下,D与A、A与C差异不显著;在α=0.01水平下,D、A、C三者均数间差异不显著,其余差异显著;表2抑菌圈直径变化趋势与表1相同;D为最佳处理方式,而B处理效果最差。
3 结论与讨论
试验结果表明,机械干燥的抑菌效果优于自然干燥,与氧气接触时间长,抑菌效果降低;同类型干燥方式,随着温度的升高,抑菌圈直径减小,抑菌效果降低。微波加热干燥先经微波炉加热3~5min后移入烘箱50℃进行干燥,干燥温度与烘箱50℃干燥温度一样,但抑菌圈直径却大于烘箱50℃干燥,原因可能是微波加热干燥时先经微波炉加热,杀灭了其中的多酚酶,使其不易被氧化,所以抑菌效果比同温度下的烘箱干燥要好。经分析,5种干燥方式中,微波加热干燥的石榴皮提取液抑菌效果优于其它方式。(收稿:2012-06-16)
参考文献
[1] 杨丽平,杨永红.石榴皮的研究进展[J].云南中医中药杂志, 2004,(3):6-7
[2] 王玲,焦士蓉,雷梦林,等.石榴皮多酚的提取及抑菌作用[J].安徽农业科学,2010,(17):103-106
[3] 朱忠勇.实验医学检验
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