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基层医院HBsAg检测方法选择作者单位：225401 江苏省泰兴市肿瘤医院? 通讯作者：蔡凤萍 【摘要】 目的 通过对HBsAg检测方法的比较，选出适合基层医院检验科使用的方法。方法 用酶联免疫吸附试验、化学发光免疫分析法、胶体金免疫层析实验三种方法分别同时对本院住院的259例患者血清标本进行检测。结果 酶联免疫吸附试验和胶体金免疫层析实验的敏感度和特异度均低于化学发光免疫分析法,差异无统计学意义（?P?0.05）。结论 酶联免疫吸附试验检测HBsAg灵敏度高、特异性好，适宜基层医院应用。? 【关键词】 HBsAg; 酶联免疫吸附试验; 化学发光免疫分析法; 胶体金免疫层析实验; 基层医院? doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.06.042 ?? 据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染过HBV,其中3.5亿人为慢性感染者，每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。我国属高流行区，一般人群HBsAg阳性率为9.09%，接种与未接种乙型肝炎疫苗人群HBsAg阳性率分别为4.51%和9.51%??［1］?。检测HBsAg在该类疾病的预防、诊断及控制的过程中是重要的依据。然而，由于试剂的敏感性及特异性等指标的差异，部分HBsAg滴度表达很低的标本，不同方法测定的结果也有所差异，造成一定的漏诊和误诊，甚至引发医患矛盾和医疗纠纷??［2］?。为了找到一种适合基层医院应用的方法，笔者对三种方法进行了试验观察，现报告如下。? 1 材料与方法 1.1 血清标本 血清标本选自本院住院的患者共259例，其中已确诊的乙肝患者126例，健康对照133例。 1.2 试剂与仪器 酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂由上海科华生物工程有限公司提供，胶体金免疫层析实验（GICA）试纸条由蓝十字生物药业（北京）有限公司提供，化学发光免疫分析法（CLIA）试剂由罗氏生物诊断产品（上海）有限公司提供及Rodche170发光仪。 1.3 方法 259份标本用三种方法同步进行检测，均严格按照试剂盒说明书及仪器操作规程进行操作。 1.4 检测结果评价标准 ELISA以肉眼观察，以阴、阳性对照孔为参照，有颜色者为阳性。CLIA以超过正常参考值为阳性，正常参考值以内为阴性。GICA以在检测线和质控线位置上各出现一条紫红色条带为阳性结果，仅质控线位置上出现一条紫红色条带为阴性结果，质控线位置上没有紫红色条带为无效结果。 1.5 统计学处理 应用PEMS 3.1医学统计学软件对数据进行处理，计数资料比较采用?χ??2检验，以?P?0.05）。在126例阳性标本检测中，CLIA的灵敏度最高（98.4%），特异度为98.5%；ELISA的灵敏度为97.6%，特异度为95.5%；GICA的灵敏度为93.6%，特异度为97.0%。见表1。 3 讨论? GICA是用胶体金标记技术和蛋白质层析技术结合的以微孔滤膜为载体的快速的固相膜免疫分析技术，交联抗HBs单克隆抗体，与待检血清中HBsAg结合，形成双抗体夹心一步法测定方法，简便快捷，标本随到随做，能满足献血员筛查以及急诊患者的需要，无需仪器，但假阴性率较高，有报道显示，对于全血标本，由于血细胞的干扰，GICA的检测限值更高，只能达到2~5 ng/ml??［3］?，易引起不必要的医患纠纷，而且成本较高，在基层医院不适宜推广应用。? CLIA是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。它兼有发光分析的高灵敏性和抗原抗体反应的高特异性，无放射性污染，是近年来发展较快的新一代标记免疫分析技术。此方法灵敏度和特异度均高于其他两种方法，操作起来也很方便，但其试剂成本贵，也需要特殊仪器，更适宜标本量较多的单位使用，绝大多数的基层医院不适宜推广和应用。? ELISA基本原理是将抗体（抗原）包被在固相表面后，按不同步骤加入待测抗原（抗体）和酶标抗体（抗原），经充分反应再洗涤，最后加底物，根据酶对底物催化的显色反应程度，而对标本中的抗原（抗体）进行定性或定量。此方法灵敏度和特异性均较好，操作也不繁琐，成本低廉，为实验室所喜爱，是目前各实验室应用最广泛的HBsAg检测方法??［4］?，也更适合在基层医院普及和应用。? 本文通过对三种方法的实验观察，认为ELISA检测HBsAg因其诊断指标较理想（灵敏度和特异度均较好），质量稳定，试剂成本低，操作也简便，较适合基层医院应用。? 参 考 文 献 ［1］ 倪语星.临床微生物学与检验［M］.第4版.北京：人民卫生出版社，2007：445. ［2］ 张瑞青，尹艳霞，杨聪慧.常用乙型肝炎血清学标志物的