牛Sry亚细胞定位及其对Sox9基因表达的影响.pdfVIP

动物学报 54(5)：890—896，2o08 Ac0 ．，0ofogc。5nc。 牛Sry亚细胞定位及其对 9基因表达的影响* 韩凤桐 吴 宁 廖 冰 林秀坤 刘 娣 1．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100094 2．东北农业大学动物科技学院，哈尔滨 l50030 3．黑龙江省农业科学院，哈尔滨 l5oo86 摘 要 为鉴别牛 sry基 因的下游 目的基因，并确定 蛋 白在细胞内的定位 区域 ，本试验构建 pcDNA3．1 表 达载体和 pEGFP—Nl—s 亚细胞定位表达载体 ，在原代培养的生殖嵴细胞和卵巢颗粒细胞中进行 sry过表达 ，并对 性别控制相关基 因在 sry过表达前后 的表达水平变化进行检测 ，包括 S厂l(把rodo nc ￡or-1)、 把4 (GA 6nd prfJn4)、 1( f ’￡um0r ne)、s0戈9 (S refⅡfed枷 G60一9)、Am (An ffer彻 舶rm0ne)和 D似1 (D0sngese es re口en2 c一1)；并在两种细胞 中进行 了 sry亚细胞定位研究。srv在两种细胞中过表达后 ，在 生殖嵴细胞 中So9的表达水平被显著上调 ，但在卵巢颗粒细胞 中未观察到 s 9基 因被上调 ，而其他几个基因的 表达水平未受 s 影响；亚细胞定位结果表明牛 srv主要分布在细胞核内。本试验说明牛 可能间接凋控 9 表达，或存在其他不需要 s 参与的调控通路调控．s 9表达；牛 s 蛋 白起转录因子作用 [动物学报 54 (5)： 89O一896，2oo8]。 关键词 牛 sr 过表达 亚细胞定位 Sfj9 Subcellur l0cati0n 0f bOVine Sry and its regulati0n 0n 9 ● * expressl0n HAN Feng—Tong ，WU Ning ，LIA0 Bing ，LIN Xiu—Kun ，LIU Di。’ 1．InstituteofAnimalScience，CkneseAcademyofAgriculturalSciences，Be ing 100094，China 2．Co1lege0fAnimalScienceandTechnology，NortheastAgrIcu1|1lralUniVersity，Harbin 15oo30，China 3．Agrjcullu珀lAcademyofHei1on iangProv-¨ce，Hal_h_” l5()086，China Abstract Thisstudvattemptedtoidentifvtheputativetargets0fSr inthepf_t】cessofbovinesex—determinationandt0anaIyzethe localizationofSrypmtein in cells．The S genewasoverexpressedby transfectingpcDNA3．1—5ry i“primarycuituredgenital ridgece1lsandgIalnu1osace】ls，andsixgeneswhichwereidenfi矗edasimponanfinsexdetem1jnati0ninmarnmalsweeanaJyzed， inc1udingSrl(S￡er0如(ge 向￡or_1)，G叫04 (GAm 6n ngpr0e 4)， 1( fms’ mo gne)，So9 (S 。把d日MG 60 9)，Am (An M fferr上n 如rm0m)，andD似 l(D0s卿 se ￡面ese renffoc 1)．SubceUularlocahzation0fthe expressedSrypr0tein in genita1ridgece1lsandgranu