脑胶质瘤细胞放射抗拒的比较蛋白质组学研究.pdfVIP

《中国神经肿瘤杂志》2008，6(3)：179—183 179 ． 论著 ． 脑胶质瘤细胞放射抗拒的比较蛋白质组学研究 胡 震 ，刘少军4，刘 炜 ，黎明涛4夏云飞13，陈忠平 ’。 (1．华南肿瘤学国家重点实验室，广东 广州 510060；2．中山大学肿瘤防治中心神经外科， 广东 广州 510060：3．中山大学肿瘤防治中心放疗科，广东 广州 510060；4．中山大学基础 医学院蛋 白质组学实验室，广东 广州 510080) 摘【要】背景与 目的：脑胶质瘤是神经外科最常见的恶性疾病 ，放射治疗是重要手段之一，但大部分患者对 放疗不敏感或放疗后复发 本文研究人脑胶质瘤细胞株MGR2及其经间歇性大剂量 X射线照射而存活的后代 细胞 MGR2R52在蛋 白质组水平 的表达差异 ．旨在探讨胶质瘤放射敏感性 以及放射后存活肿瘤细胞的分子机制 以提高胶质瘤的治疗效果 。方法：提取MGR2和 MGR2R52及二者经2Gy照射后继续培养 48h细胞的总蛋 白，分 别进行Cydve染料标记和胶内差异双向电泳(2D—DIGE)分离：经Typhoon9400型多功能激光扫描仪不同波长的 激光扫描后 ．获取荧光胶 内差异表达 图谱 。继而采用 DeCyder软件进行 图谱分析 ；选取 2D—DIGE图谱 中差异表 达≥1．5倍且 P值≤O．001的蛋 白质斑点．通过全 自动斑点处理工作站切点、酶解和点样后 ．使用基质辅助激光解 吸，电离一飞行时问质谱仪(MALDI—TOFMS)进行蛋 白质的肽指纹图谱fPMF’)鉴定。结果：MGR2与 MGR2R52之 间共有 11O个蛋白点强度差异 ≥1．5倍 (P0．001)．经 MALDI—TOF—MS鉴定发现干扰素诱导的Mx蛋 白和人发动 蛋白2(片断474—870)在 MGR2R52中表达显著增高．分别增加4．66及9．O3倍 ．并且两者同属于发动蛋白家族 。 结论 ：发动蛋 白家族在放射存活的胶质瘤细胞 中表达明显增加 ．其在胶质瘤细胞放射抗拒机制 中的作用可能与 促进细胞 内吞功能有关 ．在此基础上进行胶质瘤放疗联合以腺病毒为载体的基因治疗研究 ．将有可能提高胶质 瘤的治疗效果 关键词：胶质瘤 ；放射治疗 ；胶内差异双 向电泳；基质辅助激光解吸，电离一飞行时间质谱 ；发动蛋白 中图分类号：R739．41 文献标识码：A 文章编号：1726—8192(2008)03—0179—05 ComparativeProteomicAnalysison RadiOresistance0f Human Glioma Cell ZhenHu，Shao-jun “u4’WeiLiu4,Yun—feiXia，Zhong—pingChen二 ． StateKeyLaboratoryofOncologyinSouthernChina,Guangzhou51006~2．Departmentof NeurosurgeryandNeuro-·oncology,CancerCente5SunYat-S·enUniversity,Guangzhou51006~ 3．DepartmentofRadiationOncology,CnacerCeriter,SunYat—SenUniversity,Guangzhou510060； 4．LbaoratoryofProteome，theSchoolofPreclinicdMedicine，SunYat—SenUniversity, Guangzhou5／O08E P．R．China A【BSTRACT】BACKGROUND ＆OBJECTIVE：Toinvestigatethemolecularrnachnisn1ofradiore． sistance inhuman glioma，the expression prof