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人参多糖抗氧化活性探究摘要：采集我国人参主产地长白山区的人参，煎煮法提取人参根中与茎叶中的粗多糖，再进一步分离出酸性多糖和中性多糖，并用苯酚-硫酸法测定人参多糖的含量；DPPH法测定人参多糖的抗氧化活性。结果表明：地上部分的多糖抗氧化活性高于地下部分的多糖；地上部分的多糖抗氧化活性表现为：总多糖高于中性多糖高于酸性多糖；地下部分的多糖抗氧化性表现为：总多糖高于中性多糖，酸性多糖没有抗氧化性。 关键词：人参多糖；含量测定；DPPH；抗氧化 中图分类号：S567.51 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2010）-12-0084-2 人参Panax Ginseng C.A. Mey为五加科人参属植物，是传统的中药，被誉为百草之王，中国东北三宝之首，含有皂苷、多糖、挥发油、生物碱、氨基酸、多肤等多种化学成分。人参的主要药用成分为人参皂苷，国内外研究报道很多。从1980年开始，先后确定人参果胶具有药理活性[1-4]。人参多糖是研究较早的多糖类生物活性成分，但其对人体的强壮作用无法与人参皂苷相比，其生物活性主要表现在抗氧化活性方面[5]。后又为了更好的开发人参的地上部分，先后系统地从人参的茎、叶、果中提出水溶性多糖[6-10]。 作为人参主要的生物活性成分之一。人参多糖具有抗氧化，增强免疫、抗肿瘤等生理功能。出于人参多糖良好的多种生物活性及良好的临床效果，多年来在国内外己成为中药提取及中草药现代化研究的焦点之一[11]。 本实验探讨了人参粗多糖及酸性多糖和中性多糖的含量，并比较了它们的抗氧化活性，旨在为更好地将人参多糖应用到临床医疗及保健之中，最大效果的发挥其作用提供依据。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 样品 所用人参采自吉林省长白县，采收时间为九月，为四年生人参。（所用材料经吉林农业大学中药材学院张连学教授鉴定。） 1.1.2 仪器与试剂 无水葡萄糖、DPPH为化学纯，其余试剂均为分析纯；HH-6B 数显恒温水浴锅（金坛市精达仪器制造厂）；LD5-2A型离心机（金坛市富华仪器有限公司）；85-2数显恒温磁力搅拌器（金坛市大地自动化仪器厂）；真空干燥器（金坛市富华仪器有限公司）；UV-754分光光度计（山东高密彩虹分析仪器有限公司）；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 1.2 实验方法 1.2.1 粗多糖的提取 分别取人参根粉末与人参茎叶粉末各30g，精密称定。用煎煮法提取，常规干燥后，经脱淀粉、脱蛋白纯化后分别得到人参根和茎叶粗多糖。 1.2.2 人参多糖的分离 将人参粗多糖用1M氯化钠水溶液配制成5%溶液，4℃过夜后，3500r/min离心15min后，分别收集沉淀和上清液。然后分别按下述方法处理： 上清液：用80%（v/v）乙醇沉淀过夜，次日3500r/min离心15min后，弃去上清，沉淀溶于水后，80%乙醇（v/v）再次乙醇沉淀过夜，次日3500r/min离心15min后，收集沉淀，沉淀放入盛有五氧化二磷的真空干燥器中真空干燥。干燥后得到中性多糖。 沉淀：再次溶于1M氯化钠溶液中，4℃过夜后，3500r/min离心15min后，沉淀溶于水后80%（v/v）乙醇沉过夜，次日3500r/min离心15min后，得到的沉淀放入盛有五氧化二磷的真空干燥器中真空干燥。干燥后得到酸性多糖。 1.2.3 多糖样品溶液的配制 精密称取多糖样品0.025g，置于25mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，使其浓度为1mgmL-1；并分别稀释成以下6个浓度的溶液：0.5mgmL-1，0.25mgmL-1，0.2mgmL-1，0.1mgmL-1，0.05mgmL-1，0.025mgmL-1。 1.2.4 DPPH的配制 精密称取DPPH 0.0197g，用甲醇定容到500mL容量瓶中，得到10-4molL-1的溶液。 1.2.5 DPPH清除活性 取三组试管，第一组的试管中分别加入7种浓度的多糖样品溶液2mL和DPPH溶液2mL，室温反应30min，在517nm下测吸光度A1，在第二组试管中加入2mL甲醇和2mLDPPH溶液作为对照测出吸光度A0，在第三组试管中加7种不同浓度的样品溶液2mL和2mL甲醇，测得吸光度A2。每组实验均平行三次，对DPPH(I%)可用下式计算： I%=[1-(A1-A2)/A0]×100% （式中：A1 ：2ml DPPH溶液+2ml的不同浓度的样品溶液 A0：2mlDPPH溶液+2ml甲醇的吸光度A2：2ml样品溶液+2ml甲醇的吸光度） 2 结果与分析 2.1 多糖含量的测定 在上述实验条件下，提取不同部位的人参多糖，用苯酚-硫酸法用分光光度计在波