烟草组织蛋白酶B基因的结构特征分析及mRNA表达.pdfVIP

烟草科技 ／TobaccoScience＆Technology 烟草农学 ／Tobacco Agronomy 2012年第 4期 (总第 297期 ) 烟草组织蛋 白酶B基因的结构特征分析及mRNA表达 赵 敏 。汪长国 ，刘 劲 ，寇明钰 ，李 宁 ，吴 艳 ，戴 亚 。夏庆友 - 1．川渝中烟工业公司技术中心，成都市成龙大道 1段56号 610066 2．西南大学生物技术学院，重庆市北碚 区天生路2号 400715 3．重庆大学农学及生命科学研究院，重庆市沙坪坝区沙正街 174号 400030 摘要 ：为 了明确烟草中组织蛋 白酶B基因的功能，对烟草组织蛋 白酶B基因(NbCathB)进行 了序列分析。 该基 因ORF长951bp，编码 316个氨基酸 。该基 因蛋 白质的预测分子量为 35．2kD，等 电点为 6．14。对 NbC。thB的基 因结构分析显示 ，该基 因具有 8个外显子 ，外显子 ／内含子边界 处均符合 GT—AG规则。比较 NbCⅡthB和AtCathB基 因，显示两者编码氨基酸序列一致性为 61％。通过 SMART软件分析 ，NbCathB和 AtC。thB基 因的结构域很相似 。在上清液、菌体、茵液 以及水4种处理烟叶 中的表达谱鉴定显示，在喷施 MP制剂f巨大芽孢杆菌1茵体和茵液的烟叶中Ⅳ6c0 曰的表达量明显高于在喷施MP制剂上清液的烟叶中 的表达量，而在喷施水的烟叶中的表达量最低 。说明NbCathB很可能发挥 了AtCathB相 同的作用。 关键词 ：组织蛋 白酶B基因；烟草；MP制剂 中图分类号 ：TS414 文献标识码 ：A 文章编号 ：1002—0861(2012)04—0072—04 Structural Characteristic Analysis and inRNA Expression of Cathepsin B Gene in NiCOtiana tabacum ZHAOMin(1)，WANGChangguo(1)，LIU Jin(2)，KOUMingyu(1)，LINing(1)，wUYan(1)，DAIYa (1)，andXIAQingyou(2，3) 1．TechnologyCenterofChinaTobaccoChuanyuIndustrialCo．，Ltd．，Chengdu610066，China 2．CollegeofBiOtechnOlOg SouthwestUniversity,Chongqing400715，China 3．InstituteofAgronomyandLifeScience，ChongqingUniversity，Chongqing400030，China Abstract：InordertoclarifythefunctionofCathepsinB gene(NbCathB)inNicotianatabacum，thesequence ofNbCathBwasanalyzed．TheNbCathBORF(OpenReadFrame)was951bpinlengthandencoded316amino acidswith thepredictedmolecularweightof 35．2kD and isoelectricpointof6．14．TheanalysisofNbCathB genestructurerevealed thattherewere8exonsinNbCathB andallofthem conformedtoGT-AG urle．NbC0thB shares61％ identityinencodedaminoacidsequencewithArabidopsisthalianaCathepsinB (AtCathB)．SMART SOftware analysis indicated that．NbCathB and AtCathB had similar structura1domain．The expression of NbCathB in tobacco 1eaveswhich treated bythe depositand bacteria1liquid ofMP agentswerehigherthan thosetreatedbythesupematantofMP agents (Bacillusmagaterium)．Theexpression ofNbCathB intobacco leavestreatedbywaterwasthelowest