HPLC法测定妇科止带片中盐酸小檗碱的含量.pdfVIP

陕 西 中 医 学 院 学 报 2008年3月第3l卷第2期 · 56· Journal of Shaanxi College of Traditional Chinese Medicine Mar．2008 Vo1．31 No．2 HPLC法测定妇科止带片中盐酸小檗碱的含量 益小刚 田 芳 高 建 (成阳医药科技服务中心，陕西成阳712083) 摘 要：目的建立妇科止带片中盐酸小檗碱含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为(Diamon~il (TM)C 柱，流动相为乙腈 一0．1％磷酸(28：72)，检测波长为265 nm。结果 盐酸小檗碱的线性范围为0．291 g ～ 1．940 lag，r=0．9997，回收率为99．5％，RSD(％)=1．371％(n=6)。结论本测定方法简便、准确、重复性好， 可用于测定妇科止带片中盐酸小檗碱的含量。 关键词：高效液相色谱；妇科止带片；盐酸小檗碱 中图分类号：R927．2 文献标识码：B 文章编号：1002—168X(2008)02—0056—02 妇科止带片是以椿皮、五味子、黄柏、龟板、茯 苓、阿胶、山药七味制成的中药制剂，具有滋阴益 肾，清热燥湿，收敛止带的功效。本品中黄柏为君 药，含有大量的盐酸小檗碱，且盐酸小檗碱为本品 的主要生物活性成分，目前盐酸小檗碱含量测定方 法主要有薄层扫描法和高效液相法，为更好的控制 产品质量，对该制剂中盐酸小檗碱含量测定方法进 行考察。 1 仪器与试药 1．1 仪器 岛津LC—AT液相色谱仪；岛津SPO — l0 A检测器；浙大N2000色谱工作站；LGC一 1025M柱温箱；SB一3200型超声清洗器。 1． 2 试药 妇科止带片；盐酸小檗碱对照品(中 国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号0713 — 9906)；乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂均 为分析纯。 2 方法与结果 2．1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱(Diamonsil(T1M)Cl8 5 pan，250 x4．6 mm)； 图3 流动相：乙腈一0．1％磷酸溶液(28：72)；检测波 2．2 对照品溶液制备 精密称取在五氧化二磷干 长265 am；流速1 mL／min；柱温23℃。在此条件 燥器中干燥36 h的盐酸小檗碱对照品适量，加甲 下样品中的盐酸小檗碱得到良好的分离(见图1、 醇制成每1 mL含0．097 mg的溶液，摇匀，即得。 图2)，理论塔板数以盐酸小檗碱的吸收峰计算应 2．3 样品供试液制备 取本品20片，除去薄膜 不低于3000，缺黄柏的阴性对照在盐酸小檗碱的 衣，研碎，精密称取粉末0．8012，置50 mL容量瓶 吸收峰处几乎无吸收(见图3)。 中，精密加入甲醇(分析纯)40 mL，超声处理40 min，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过， 弃去初滤液，收集续滤液，作为供试品溶液。 2．4 阴性溶液的制备 精密称取干燥至恒温的不 含黄柏的妇科止带片粉末0．8239 g，按供试品溶液 的制备方法，制成阴性溶液。 2．5 标准曲线及线性范围 分别精密吸取对照品 溶液(0．097 mg／mL1)1．5、2．5、5、7．5、10 mL 于 10 mL容量瓶中，加甲醇定溶至刻度。得浓度分别