上海市虹口区水环境霍乱弧菌监测分析.pdfVIP

上海预防医学 2012年第24卷第4期 ShanghaiJournalofPreventiveMedieine 2012，Vo1．24 No．4 文章编号：1004—9231(2012)04—0180—03 · 感 染 病 防 治 · 上海市虹口区水环境霍乱弧菌监测分析 张静，陈真，唐漪灵，沈静，王姗，姚红 (上海市虹 口区疾病预防控制中心，上海 200082) 霍乱弧菌广泛存在于近海岸的水体和水产品中， 物肛门、鱼鳃及体表，置碱性蛋白胨水(36-i-1)cc培 其中Ol群和0139群霍乱弧菌是霍乱的致病菌。上 养6～8h后，取菌膜下培养物划线接种 “双洗”琼脂 海市虹 口区是国家级霍乱监测点。我们按照国家监 及碱性营养琼脂挑取可疑菌落进行革兰染色镜检、氧 测方案于2008--2010年采集国家监测点水体和水产 化酶反应、生化试验，同时用霍乱弧菌诊断血清做玻 品，检测Ol群霍乱弧菌和0139群霍乱弧菌，了解和 片凝集试验。 掌握本地区水体和水产品霍乱弧菌的污染情况，为霍 1．4 PCR检测 乱的防控提供实验室依据。 PCR检测霍乱弧菌毒力基因ctxA试剂盒由上海 宝生科技有限公司提供。扩增条件及具体操作均按 1 材料与方法 试剂说明书进行。 1．1 样品来源 1．5 药敏试验方法 2008--2010年，我们在虹 口区采集国家监测点 采用WHO推荐的改良K—B纸片法。药敏纸片 水体720份和水产品380份(表 1)。 包括：环丙沙星(CIP)、诺氟沙星 (NOR)、丁胺卡那 霉素(AN)、复方新诺 明(SXT)、强力霉素(DO)。实 1．2 试剂及仪器 验所用的药敏质控菌株大肠埃希菌ATCC25922为上 碱性蛋 白胨水、“双洗”琼脂、O1群霍乱弧菌多 海市疾病预防控制中IL,(疾控中心)微生物实验室提 价、小川、稻叶、0139群诊断血清均购 自华康科技开 供，结果判断按照2008美国国家临床实验室标准化 发公司；5种抗生素药敏纸片由OXOID生产；MH琼 委员会 (CLSI)文件规定。 脂由科玛嘉公司生产 ；氧化酶试剂、革兰染液、ID32E 生化反应鉴定条为法国生物梅里埃公司生产，均在有 2 结果 效期内使用。 2．1 检验结果 1．3 检 测方 法 2008--2010年，本区共采集国家监测点水体720 按 《霍乱防治手册》(第5版)要求，对采集样品 份和水产品380份。在 720份水体样品中，养殖水 进行增菌、培养、鉴定。样品前处理方法：对于鱼类样 216份分离检测出6株霍乱弧菌，从380份水产品中 品采集鳃部和／或肠内容物以无菌操作剪碎后置碱性 未检出霍乱弧菌。6株霍乱弧菌中5株为O1群霍乱 蛋白胨水培养；贝壳、甲壳类样品，如为细小动物，则 弧菌非流行株 (小川型2株、稻叶型 3株)，1株为 将样品打碎后 ，取25—50g置碱性蛋白胨水中增菌 0139群霍乱弧菌流行株。3株稻叶型霍乱弧菌不是 培养；以肛门、鱼鳃及体表涂抹法为主的海 (水)产 产毒株，其余均为产毒株(表2)。 品，结合整体或部分采集法，以无菌棉签涂抹水生动 表