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大豆GmcpSecA基因克隆及表达特异性分析
摘要 摘要 See途径是将核编码的叶绿体蛋白输入到类囊体腔的蛋白分选途径之一， 对叶绿体正确行使其功能有重要作用。前期研究获得了拟南芥AtcpSecA基因功 能缺失的突变体agyl，其叶片呈黄白色，叶绿体发育缺陷，内部缺少类囊体片 层结构。我们从大豆中克隆了拟南芥AtcpSecA的同源基因GmcpSecA基因的全 长cDNA序列和5’端ATG上游1．5 kb的启动子：同时构建了GmcpSecA：：GUS 和CaMV 35S：：GmcpSecA融合基因的双元表达载体，以农杆菌介导的转化方法 获得转基因拟南芥。GUS组织化学染色结果表明：在GmcpSecA：：GUS转基因 拟南芥的子叶、叶片、萼片等绿色组织中都可以检测到较强的GUS活性，而在 非绿色组织中没有检测到GUS表达。 以双元表达载体CaMV 35S：：GmcpSecA转化拟南芥叶绿体结构与功能缺失 GmcpSecA基因与AtcpSecA基因功能相似，在叶绿体发育过程中发挥重要作用。 以双元表达载体CaMV35S：：GmcpSecA转化野生型拟南芥，通过表型分析发现， 与野生型拟南芥相比，CaMV 35S：：GmcpSecA转基因拟南芥生长更加旺盛，莲 座较大，叶片绿色较深，抽薹较早，以及对光敏感性增加。 关键词：大豆GmcpSecA基因表达特异性功能回补叶绿体发育 Abstract Abstract The isessentialfor into See-dependentproteinsortingpathway proteinimport functionthe the lumenandis forthe of thylakoid importantproper chloroplast．We have thecharacterizationofaloss-of-functionmutantof previously epSecA， reported mutantalbino theATPasesubunitoftheSec is proteincomplex．Thehomozygous and lacksthe structure．Weclonedthe lethal，and full·length seedling thylakoid eDNAof andits1．5kb ofthe sequenceupstreamcodingregion GmcpSecA promoter from examinedthe of RT-PCRin soybean,and expressionpatternsGmcpSecAby this constructed and fusion
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