硅油小滴对人视网膜色素上皮细胞吞噬活性的影响论文.docVIP

　　硅油小滴对人视网膜色素上皮细胞吞噬活性的影响论文 马丽娜 惠延年 王雨生 张乐 王静波 徐建峰 马吉献 【摘要】 目的：探讨一定大小的乳化硅油小滴能否影响视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial , RPE）细胞的吞噬能力。方法：将硅油挤压通过一种微孔滤膜制成大小相似的小滴。用酞箐蓝标记硅油小滴。培养的人RPE细胞与硅油小滴，伴或不伴有血清，共同孵育24h。被细胞内吞的小滴在显微镜下计数。测量人RPE细胞在体外吞噬硅油小滴的数量。结果：挤压通过这种微孔膜制成的硅油小滴至少稳定5d，硅油小滴的直径为4.25±0.77μm。乳化硅油浓度不同，RPE细胞吞噬硅油小滴的数量有明显剂量依赖性，随浓度增高，吞噬数量也增加。加有血清的硅油小滴使RPE细胞的吞噬能力进一步增强。结论：硅油小滴能刺激RPE细胞的吞噬能力，含有血清时对RPE细胞的吞噬能力有进一步的刺激作用。 【关键词】 色素上皮 眼 硅油 乳化 吞噬 Effects of vesicles of silicone oil on phagocytosis of human retinal pigment epithelial cells in vitro Abstract AIM: To investigate ent epithelial (RPE) cells can be influenced by emulsified silicone oil droplets ilarly sized vesicles of silicone oil icro-pore filter membrane. Vesicles of silicone oil onitored an RPE cells for 24 hours. The numbers of the vesicles engulfed in the RPE cells icroscope. The main oute measure bers of silicone oil in vitro. RESULTS: Extruding silicone oil through the membrane resulted in the production of vesicles that remained stable for at least 5 days. The mean vesicle diameter . Vesicles of silicone oil had a dose-dependent influence on RPE cell phagocytosis. The more the concentration of the vesicles, the more phagocytosis the cells did. Phagocytosis of the vesicles by cultured RPE cells ulated by serum added in the culture medium.CONCLUSION: These in vitro data shoulsified. Vesicles of silicone oil can stimulate the ability of RPE cell phagocytosis. The serum can further stimulate the ability of the phagocytosis. · KEYEM , Gibco , USA )中加入100mL/L新生牛血清（四季青产品）、青霉素（100×103U/L）、链霉素（100×103U/L），培养箱中37℃，50mL/L CO2常规培养，次日更换培养液继续培养。选择3～6代细胞用于实验。将对数生长期的细胞按5×108个/mL密度接种于预置有盖玻片（8mm×8mm）的24孔板中，接种24h后更换培养液，每孔加入2mL培养液。实验分两组，第1组加入DMEM培养液，第2组加入加有100mL/L新生牛血清的DMEM培养液。分别向2组细胞中加入硅油含量为0（10mmol/L PBS液，空白对照），12.5,25.0,50.0mL/L的染色乳化硅油液100μL，常规培养24h，取出爬片，10mmol/L PBS液充分冲洗3次，40g/L多聚甲醛固定0.5h，用吸管吸取多聚甲醛轻轻冲洗爬片上残留硅油小滴3次，10mmol/L PBS液漂洗3次，待测。光学显微镜下观察，每张爬片随机取3个视野，每个视野至少计数50个细胞，用图象采集分析系统(Image－Pro Plus 6.0)计算细胞内吞的染色硅油小滴来分析RPE细胞对硅油小滴的吞噬作用。每个浓度设3个