第五章 转录(下)(转录后加工,剪接,编辑).pptVIP

RNA的剪接 生物体内内含子的主要类型： 1.核基因mRNA的内含子 2,Ⅰ类内含子 3.Ⅱ类内含子 剪接方式： 1.剪接体完成的剪接 2.自我剪接 3.由蛋白酶完成的剪接  一、核基因mRNA的剪接 1. 参与RNA剪接的物质： snRNA（核内小分子RNA） snRNP（与snRNA结合的核蛋白） 1. A的3’-OH攻击5’-剪接点，E1释放，形成套环 结构 2. E1的3’-OH 攻击3’-剪接点，E1和E2连接， 释放套环 3. 套环结构切断，降解 二、Ⅰ类内含子的自我剪接 I类内含子的剪接过程 ---- 四膜虫rRNA为例 1. G-OH攻击5’-剪接点释放5’端的外显子 E1-OH， G-I-E2 2. E1的3’-OH 攻击3’-剪接点，E1和E2连接， 释放I 3. 线形I经多次磷酸酯转移反应，释放15个核 苷酸，4个核苷酸，最后成为稳定的线形产 物L19. RNA的编辑 编辑（editing）是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 本章重点和难点 1. 基本概念：编码链, 模板链, 启动子, 转录单元 2. 启动子的特点（原核+真核） 3. RNA 聚合酶的特点（原核+真核） 4. 转录的起始、延伸和终止，抗终止作用 5. 转录后的加工, RNA的剪接 尿苷酸的缺失和添加 1986.R.Benne在研究锥虫线粒体mRNA转录加工时发现mRNA的多个编码位置上加入或丢失尿苷酸，1990年在高等动物和病毒中也发现了编辑现象。 三、酵母tRNA的剪接 锥虫coxII基因的编辑 3、DNA模板链为 5’-ATTCAG-3 ’ , 其转录产物是: A. 5 ’ -GACTTA-3 ’ B. 5 ’ -CTGAAT-3 ’ C. 5 ’ -UAAGUC-3 ’ D. 5 ’ -CUGAAU-3 ’ D * * 第四节 RNA的剪接 Primary transcript hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为 杂化核RNA （hetero - nuclear RNA , hnRNA ) snRNA ( small nuclear RNA ) （并接体） 核内的蛋白质 核糖核酸蛋白体 snRNA 2、识别信号：GU……..AG 100%保守 分支点A 3、过程 —— 除去hnRNA中的内含子，将外显子连接 并接体 UACUACA - AG UG U4 U5 U6 E1 E2 U1 U2 UACUACA - AG UG U6 E1 E2 U1、U4、U5 核基因mRNA的剪接过程 剪接体 1、识别信号：5’-U 3’-G (ppG,pppG) pGoH U -OH G ? pU pA G -OH pA U ? pU 第一次转酯反应 第二次转酯反应 U ? pA G ? pU 外显子 内含子 外显子 G OH 3’ G 5’ OH 5’ 3’ G OH 414 G 399 5’ 3’ 395 5’ 3’ E1 E2 I 四膜虫RNA的自我剪接 5’ 3’ L19RNA 具有催化活性的片段 三、Ⅱ类内含子的自我剪接 套索结构 美国科学家，因发现mRNA的剪接于1993年获诺贝尔奖 C变为U 碱基的突变 4、机制 英国科学家，因发现断裂基因于1993年获诺贝尔奖 2’ 0H 5’ 外显子1 GU PyNCUPuAPy AG 外显子2 3’ 5’ 外显子1 G 外显子2 OH 3’ U AG 3’ TAPy 套索结构