改良SDS法快速提取赤芍干叶片DNA的研究.PDFVIP

中草药 　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月 ·571 · 氢钾 、乙腈1 %磷酸 、乙腈002 mol/ L 磷酸二氢钾 33 　色谱柱 的选择 : 选用大连依利特 Hyp er sil 作为流动相进行试验 ,结果表明以乙腈002 mol/ L ( μ ) OD S2 色谱柱 250 mm ×46 mm , 5 m 、兰州化物 磷酸二氢钾线性梯度洗脱为最佳 ,谱图上各色谱峰 ( μ ) 所 OD S 色谱柱 250 mm ×46 mm , 5 m 、Dikma (230 nm) 分离度较好 ,保留时间适中 , 峰形好 。因 ( μ ) 公司 Diamon sil C18 柱 250 mm ×46 mm , 5 m 进 此选此洗脱系统作为痛安注射液的 H PL C 指纹图 行试验筛选 , 比较分离度和柱效 ,结果 Dikma 公司 谱检测的流动相 。 Diamon sil C18 较为合适 。 32 　检测波长的选择 :按照前述色谱条件 ,精密吸 本实验采用 H PL C 法所建立的痛安注射液指 取供试品溶液进样 ,得 200 ～400 nm 波长 DAD 扫 纹图谱可以在一个色谱条件下 , 同时实现整体定性 、 描图谱 ,结果在 230 nm 测定的信息量多 ,特征最为 明显 , 图谱中的各指纹峰信号强 ,分离效果较好 。因 多指标成分定量的功能 ,为复方中药的质量控制及 此选用该波长作为检测波长 。 稳定性评价提供了新的方法模式 。 改良SDS 法快速提取赤芍干叶片D NA 的研究 1 ,2 3 1 1 徐 　芳 ,王丽萍 ,陈　波 ,姚守拙 ( 1. 湖南师范大学 化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室 ,湖南 长沙 　4 10081 ; 2 . 长沙医学院 , 湖南 长沙 　4 102 19 ; 3 . 湖南省分析测试中心 ,湖南 长沙 　4 10007) 摘 　要 : 目的　从富含多糖和小分子杂质的赤芍干叶片中快速分离出适用于各生物技术分析的高质量基因组 DNA ,为赤芍的鉴定研究提供实验基础 。方法 　以常规的 SD S 法为基础 ,进一步优化 DN A 提取各步骤 ,获得了一 种快速可行的提取高质量赤芍干叶片 DN A 的方法 。结果 　使用该方法从 4 个不同产地的赤芍干叶片中分离的 DNA A 260/ A280 分别为 190 、1 88 、19 1 、193 ,所需时间均小于 25 h ,所得 DN A 分别直接用于 PCR 分析 ,结果满 意 。结论 　该方法用于提取