微生物标准操作规程三14.docVIP

XXX人民医院检验科微生物室 标准操作文件 文件编号：WSW-SOP-007 版本号：2007 第1次修改 编写者：XXX XXX 审核者：XXX 修订日期：2012年1月15日 页码：第 1 页 共 2 页 克雷伯菌属检验标准操作规程 1．概述 克雷伯菌属包括肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、鼻硬结克雷伯菌和臭鼻克雷伯菌4个种。临床以肺炎克雷伯菌最为常见。 2．标本类型 血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3．鉴定 3.1 形态与染色 革兰阴性粗短杆菌。 3.2 培养特性 在血琼脂平板上35℃培养18～24小时呈灰白色、不溶血的菌落。在麦康凯琼脂平板上形成大而隆起、黏液样、易融合的、粉红色菌落，用接种环挑取呈丝状粘连。 3.3 生化反应 氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖等多种糖类，TSI为A／A，IMViC--++，硝酸盐还原、脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力、H?S、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验均为阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 菌属特征 琼脂平板上菌落较大、隆起、黏液样，用接种环挑取呈丝状粘连，发酵葡萄糖等多种糖类，IMViC--++，脲酶、赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力试验阴性。 3.4.2 克雷伯菌属的种间鉴别见．表5—36． 表5—36克雷伯菌属种间鉴别的关键性试验(阳性％) 菌名 吲哚 VP 枸橼酸盐 脲酶 赖氨酸 丙二酸盐 乳糖 肺炎克雷伯菌 0 98 98 95 98 93 98 产酸克雷伯菌 99 95 95 90 99 98 100 鼻硬结克雷伯菌 0 0 0 0 0 95 0 臭鼻克雷伯菌 0 0 30 10 40 3 30 3.5 操作步骤 3.5.1 氧化酶试验参见《氧化酶试验标准操作规程》。 3.5.2 鉴定 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4．药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20必威体育精装版版本文件。 5．质量控制 见《质量管理程序》。 6.检验结果解释与分析 肺炎克雷伯菌可产生ESBLs，据国内文献报道产酶率在30%以上，产酶株对青霉素、头孢菌素及单酰胺类抗生素均产生耐药。如果检出产ESBLs肺炎克雷伯菌，即使体外药敏试验对青霉素类、头孢菌素类或氨曲南敏感，也应报告该菌对所有青霉素类、头孢菌素或氨曲南耐药。但其对头霉素、部分加酶抑制剂的复合抗菌药和碳青霉烯类抗菌药敏感。 7.临床意义 肺炎克雷伯菌是人类呼吸道的 常居菌，在人和动物肠道内也常见，是一种条件致病菌。在临床分离到克雷伯菌属中，肺炎克雷伯菌占80%以上，是本属中最为常见的病原菌，可引起肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、菌血症等疾病。 8.鉴定流程 尿液、痰、血液等 麦康凯琼脂平板（或中国蓝平板）呈黏液样、粉红色（或蓝色）菌落 氧化酶试验阴性 仪器或手工生化鉴定并做药敏试验 克雷伯菌属