微生物标准操作规程三4.docVIP

XXX人民医院检验科微生物室 标准操作文件 文件编号：JY-WSW-SOP-007 版本号：2007 第1次修改 编写者：XXX XXX 审核者：XXX 修订日期：2012年1月15日 页码：第 1 页 共 2 页 嗜血杆菌属检验标准操作规程 1．概述 嗜血杆菌属包括流感嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、杜克嗜血杆菌等9个种。临床上以流感嗜血杆菌最为常见。 2．标本类型 血液、痰、脑脊液等标本。 3．鉴定 3.1 形态与染色 革兰阴性短小杆菌。 3.2 培养特性 在巧克力琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成微小、无色透明似露滴状的菌落。在血琼脂平板上形成极小、圆形、透明的菌落，并有“卫星现象”。 3.3 生化反应 分解葡萄糖，不分解蔗糖和乳糖，吲哚、触酶和硝酸盐还原试验均为阳性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征 革兰阴性小杆菌，多形性，菌落为无色透明似露滴状，卫星现象阳性，生长需要X、V两种因子，普通培养基不生长。 3.4.2 嗜血杆菌属的种间鉴别见表5—44。 表5-44 嗜血杆菌属鉴别的关键性试验 　 菌名 X因子 V因子 溶血 葡萄糖 蔗糖 甘露醇 木糖 触酶 硫化氢 流感嗜血杆菌 + + - + - - + + - 埃及嗜血杆菌 + + - + - - - + - 溶血嗜血杆菌 + + + + - - + + + 杜克嗜血杆菌 + - - - - - - - - 副流感嗜血杆菌 - + - + + + - V + 副溶血嗜血杆菌 - + + + + - - + + 惰性嗜血杆菌 - + - W W - - V - 副嗜沫嗜血杆菌 - + - + + + V - + 嗜沫嗜血杆菌 W - - + + + - - + 注：“+”为90%以上菌株阳性，“-”为90%以上菌株阴性，“V”为11%～89%菌株阳性，“W”表示弱发酵反应。 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色 呈革兰阴性短小杆菌。 3.5.2 鉴定 从巧克力琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4．药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100一F20必威体育精装版版本文件。 5.质量控制 见《质量管理程序》。 6.检验结果解释与分析 如果检测出β-内酰胺酶阳性流感嗜血杆菌则提示对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药（耐药机制大多为TEM1型β-内酰胺酶）。如果流感嗜血杆菌β-内酰胺酶阴性，而对氨苄西林耐药，则对阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、头孢克罗、头孢他啶、头孢尼西、头孢丙烯、头孢呋辛均耐药。 7.临床意义 流感嗜血杆菌常寄居于人呼吸道（在呼吸道定植者可达到人群的50%），当机体抵抗力下降时，可引起人类呼吸道感染；也可随血液入侵组织内部，引起脑膜炎、关节脓肿或其他部位的化脓感染。副流感嗜血杆菌寄居在人类的上呼吸道，可引起呼吸道感染，偶尔引起心内膜炎等。 8.鉴定流程 参考文献 临床微生物检验标准化操作（第二版）。 痰、脓液等 血液、脑脊液 增菌 接种巧克力平板、血平板 可疑菌落涂片、吲哚试验 可疑菌落有“卫星现象” 药敏试验、生化试验 嗜血杆菌 属