微生物标准操作规程三15.docVIP

XXX人民医院检验科微生物室 标准操作文件 文件编号：WSW-SOP-007 版本号：2007 第1次修改 编写者：XXX XXX 审核者：XXX 修订日期：2012年1月15日 页码：第 1 页 共 2 页 志贺菌属检验标准操作规程 1．概述 志贺菌属分为4个群(种)：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。 2．标本类型 粪便、肛拭子标本。 3．鉴定 3.1形态与染色 革兰阴性杆菌。 3.2培养特性 在麦康凯琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成无色透明的小菌落。在SS琼脂平板上呈无色透明或半透明的较小菌落。 3.3生化反应 氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、甘露醇，不发酵乳糖、蔗糖，TSI为K／A，甲基红和硝酸盐还原试验阳性，动力、VP、枸橼酸盐、脲酶、H?S和醋酸盐试验均阴性。 3.4鉴别要点 3.4.1本菌属特征 在SS琼脂平板上为无色透明或半透明的小菌落，TSI为K/A，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，无动力，脲酶、H?S试验均阴性。符合上述特性者，可通过血清凝集试验作出诊断。如血清不凝集，应进一步鉴别。 3.4.2志贺菌属种间鉴别见表5-35。 表5—35志贺菌属种间鉴别的关键性试验(阳性％) 菌名 半乳糖苷酶 鸟氨酸 甘露醇 乳糖 福氏志贺菌 1 0 95 1 痢疾志贺菌 30 0 0 0 鲍氏志贺菌 10 2 97 1 宋内志贺菌 90 98 99 2 注：“*”为迟反应 3.5操作步骤 3.5.1观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验参见《三糖铁试验标准操作规程》。 3.5.2血清学鉴定 参见《志贺菌血清学检测标准操作规程》。 3.5.3鉴定 从SS琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4．药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》。 5．质量控制 见《质量管理程序》。 6．检验结果解释与分析 一般志贺菌不进入血液，所以只取粪便和肛拭标本作培养。本菌大多数菌株对氯霉素、链霉素、氨苄西林耐药，多数菌株对卡那霉素、庆大霉素敏感。 7．临床意义 志贺菌属引起细菌性痢疾，表现为腹痛、发热、大量水样便，1～2日后转为少量腹泻(有里急后重现象)，便中含有多量的血、黏液和白细胞。临床主要有两种类型：急性细菌性痢疾，又分典型和不典型两种，后者症状不典型，容易造成误诊和漏诊；慢性细菌性痢疾，常因急性菌痢治疗不彻底，造成反复发作、迁延不愈，病程超过2个月以上视为慢性菌痢。 8．鉴定流程 粪便或肛拭 分离培养（SS、MAC） 增菌培养（GN肉汤） 菌落观察：SS平板上呈无色、透明或半透明较小菌落 初步鉴定：TSI,KIA/MIU 血清学鉴定 仪器或手工细菌鉴定 志贺菌属