生物制药知识点.docVIP

生制药发酵生产三要素 2．、蛋白质药物的缺点 3、生产药物的天然微生物 4、常用兼性贴壁依赖性细胞 5、治疗性单抗单域抗体单域抗体仅由重链构成，其抗原结合区仅是一个通过铰链区与Fc区连接的单结构域，而且这个抗原结合区自抗体上分离后仍具有结合抗原的功能游离细胞使细胞膜和细胞质中大部分蛋白质和脂质被溶解抽提掉， 但细胞骨架系统蛋白质却不受破坏而被保存下来，经固定和染色后可在光镜下，见到网状结构的细胞骨架，然后融合某种细胞核酶在医药领域的应用微生物转化微生物转化反应的特点基因工程药物的质量检控固定化酶的酶学特性的变化、固定化对酶活性的影响：酶活性下降，反应速度下降。也有在个别情况下，酶经固定化后其活力升高， 、固定化对酶稳定性的影响 （1）操作稳定性提高。 （2）贮存稳定性比游离酶大多数提高。 （3）对热稳定性，大多数升高。 （4）对分解酶的稳定性提高。 （5）对变性剂的耐受力升高。 、载体的带电性质对最适pH的影响 1）带负电荷的载体，固定化酶的最适pH值比游离酶的高。 带正电荷的载体，固定化酶的最适pH值比游离酶的低。 2）产物性质对体系pH的影响 催化反应的产物为酸性时，固定化酶的pH值比游离酶的pH值高；反之则低。 、固相酶的最适温度一般比天然酶高，个别会有所降低。 、作用于低分子底物的酶， 特异性没有明显变化; 既可作用于低分子底物又可作用于大分子底物的酶， 特异性往往会变化。 、固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。 19、高密度培养高密度培养的优点灌流（注）式操作发酵生产中pH的影响及其控制Ph与微生物的生命活动密切相关——酶催化活性 Ph变化是微生物代谢状况的综合反映——基质代谢、产物合成、细胞状态、营养状况、供氧状况 通过观察ph变化规律可以了解发酵的正常与否。 控制： 分阶段控制，生长最适ph和产物最适ph 缓冲液控制，碳酸钙和磷酸盐缓冲液。 补加酸或碱进行控制 补料方式控制，流加糖率来控制ph 28、发酵工程菌种选育改良的具体目标愈伤组织菌种保藏的原理措施 9、改善基因工程菌不稳定性的策略 影响质粒稳定的因素种子活化融合蛋白 诱导子是一类能引起植物细胞合成积累次生代谢物活性的物质。诱导子对植物具有专一性，在生产次生代谢物时就要选择一种适宜的诱导子。包涵体在某些生长条件下，大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子，它们致密地集聚在细胞内，或被膜包裹或形成无膜裸露结构，这种水不溶性的结构称为包涵体动物细胞培养要求1无菌无毒的环境 2营养与体内基本相同 3适宜的温度和酸碱度 4气体环境 抗体生产的发展趋势 29、包涵体表达形式的优缺点。优点1能简化外源基因表达产物的分离操作：包涵体的水难溶性及其密度远大于其它细胞碎片和细胞成分，菌体经超声波裂解后，直接通过高速离心即可将重组异源蛋白从细菌裂解物中分离出来? 2能在一定程度上保持表达产物的结构稳定 在形成包涵体之后，大肠杆菌的蛋白酶降解作用基本上对异源重组蛋白的稳定性已构不成威胁缺点：??? 以包涵体形式表达的重组蛋白丧失了原有的生物活性，必须通过有效的变性复性操作，才能回收得到具有正确空间构象（因而具有生物活性）的目标蛋白，因此包涵体变复性操作的效率对目标产物的收率至关重要。