类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞的差异蛋白质谱分析.pdfVIP

第 30 卷第2 期 第三军医大学学报 Vol. 30 , No. 2 166 2008 年 1 月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE Jan. 2008 文章编号:1∞0-5404(2∞的02-0166-04 吁错;串串 类凤湿关节炎患者滑膜成纤维细胞的差异蛋白质谱分析 柏千苹1 ， 3 ，周丽娜1 ，贺伟峰I ，罗高兴l ，陈烯伟l ，陈光兴2 ，胡晓红1 ，石东文1 ，方勇飞3 ，吴 军1 (第兰军医大学西 南医院:全军烧伤研究所，疾病蛋白质组学重庆市重点实验室，创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室 2 关节外科中心 3 风瘟科，重庆 4∞038) 摘 要:目的应用双向凝胶电泳-质谱法分析正常人及类风湿关节炎(rheumatoid arthritis , RA) 患者滑膜成纤维细 胞蛋白质组表达差异，探讨差异蛋白在类风湿关节炎发病中的作用。方法 采用固相 pH 梯度(immobilized pH gradient , IPC) 双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis , 2-D日分离正常人及类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞总蛋白质， 银染显色，PDQuest 软件分析图像，比较两种细胞蛋白质组表达差异，对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间 质谱进行鉴定，并用 Westem blot 验证部分表达差异蛋白质。结果 ①采用窄范围的 pH 4 -7 IPC 胶条进行2-DE 分析， 正常人及 RA 患者滑膜细胞蛋白胶图上分别平均显示852 、 837 个点。有49 个蛋白点在正常、RA 滑膜细胞间有 2 倍以上 的显著性量变。②分别在胶图上共选取40 个表达水平存在明显差异的蛋白质点进行质谱鉴定，鉴定出 23 个在 RA 患者 滑膜细胞中表达上调蛋白质。 Westem blot 验证Enolaseα、 Annexin 1, Catl呻sin D、 SOD2 、 Peroxiredoxin 2 在 RA 滑膜细胞中 表达显著升高。结论正常人及类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞表达蛋白质组存在差异。这些差异蛋白可能参与类 风温关节炎的发病。 关键词:滑膜成纤维细胞;蛋白质组;双向电泳;类风湿关节炎 中固法分类号: R341; R394. 2 ;R593. 22 文献标识码:A Differential proteome of human synovial fibroblasts from rheumatoid arthritis patients 13 1 1 1 2 1 BO Gan-ping . , ZHOU Li-na , HE Wei-feng , LUO Gao-xingl , CHEN Xi-wei , CHEN Guang-xing , HU Xiao-hong , 1 3 1 SHI Dong-wen , FANG Yong-fei , WU Jun CState Key Laboratory of Trauma , Bums and Combined Injury , Institute of Burns , 2Department of Orthopaedics , 3Department of Rheumatism , Southwest Hospit址， Third Military