骨髓增生异常综合征患者间充质干细胞SDF.docVIP

　　骨髓增生异常综合征患者间充质干细胞SDF 【摘要】 本 研究 探讨骨髓基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓间充质干细胞（MSC）中的表达水平。采集MDS的骨髓标本，分离、培养和扩增MSC，观察细胞形态并进行表型鉴定；以实时定量RT-PCR法检测间充质干细胞SDF-1基因和内参照磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因的表达水平，并与健康供者的表达水平相比较。结果发现，MDS患者骨髓间充质干细胞SDF-1基因的表达水平经GAPDH校正后为1.53±0.92，与对照组(5.51±0.99)相比差异非常显著(Plt;0.01)。结论：SDF-1基因在MDS患者骨髓间充质干细胞中的表达显著升高，SDF-1基因的异常表达可能 影响 MDS患者骨髓微环境的造血调控作用，是否可对MDS的发病机制及 治疗 提供新的思路值得进一步探讨。 【关键词】 骨髓增生异常综合征 　　Expression of SDF-1 Gene in Bone Marroal Stem Cells of Patients e 　　Abstract This study ed to investigate the expression level of stromal cell derived factor-1 gene (SDF-1) in bone marroesenchymal stem cells (MSC) of patients yelodysplastic syndrome (MDS). The MSC from bone marroples of MDS patients orphology and immunophenotype of MSC e quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RQ-RT-PCR) method and those in healthy donors (1.53±0.92 vs 5.51±0.99) (Plt;0.01). SDF-1 gene expression levels in bone marro healthy donors.It is concluded that the abnormal expression of SDF-1 gene in MSC may influence the regulation of hematopoiesis of the bone marroicroenvironment in MDS patients and it is echanism and treatment of MDS. 　　Key yelodysplastic syndrome; mesenchymal stem cell; SDF-1 gene; real-time quantitative RT-PCR 　　骨髓增生异常综合征 (myelodysplastic syndromes，MDS) 是一组以血细胞的质和量异常为特征的血液系统异质性疾病，迄今为止发病机制尚不明确。多数研究者认为，MDS由造血干细胞的恶性克隆性增殖引起，关于骨髓造血微环境是否参与其发病 目前 还存在争论［1］。间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）是骨髓造血微环境的重要成分，我们在新近的研究中发现，来源于MDS患者的骨髓间充质干细胞，其体外支持造血的功能显著弱于健康者来源的MSC［2］，由此设想，骨髓造血微环境特别是间充质干细胞功能的异常可能涉及MDS的发病机制。基质细胞衍生长因子-1（SDF-1）属于CXC型趋化因子，在骨髓间充质细胞中高表达，与表达于CD34+ 造血干/祖细胞及白血病细胞上的受体CXCR4特异性结合，在骨髓微环境对造血的调控中发挥重要作用。近年来的研究还发现，SDF-1/CXCR4与急、慢性白血病等血液系统肿瘤中恶性造血细胞的生长与增殖密切相关［3］，但对其在MDS发病中的作用尚缺少研究。为此我们进行了初步研究，以实时定量RT-PCR法检测了SDF-1 基因在MDS 患者骨髓MSC中的表达，并与健康人MSC的表达水平相比较。 　　材料和 方法 　　研究对象 　　8例未经治疗的MDS患者，依照2000年软件 设计完成，上游引物：5′-GCCTGAGCTACAGATGCCCA-3′；下游引物：5′-TTCGGGTCAATGCACTTGT-3′。以磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因的表达作为内参照，其上游引物：5′-GAAGGTGAAGGTCGGAGTC-3′;下游引物：5′-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3′。在ABI Prism 7700（美国Applera