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香菇多糖对荷瘤鼠免疫细胞及生存率的影响.doc
香菇多糖对荷瘤鼠免疫细胞及生存率的影响
作者:林卡莉,陈同强,黄志华,李思思, 陈方
【摘要】 目的探讨香菇多糖对荷瘤S180鼠免疫细胞及生存率的影响。方法昆明小鼠70只,分为正常盐水对照组,肿瘤模型Ⅰ、Ⅱ组,香菇多糖实验Ⅰ、Ⅱ组,生存实验模型组,生存实验给药组。观察 计算 小鼠体重、瘤重、肿瘤指数及抑瘤率,脾重及脾指数,脾组织结构,体视学方法计量脾白髓相对面积百分比及单位面积中脾小体的个数,外周血白细胞分类计数,小鼠生存质量和生存天数等指标。结果①香菇多糖有显著的抑瘤作用,并可明显延长荷瘤鼠的生存时间。②香菇多糖使脾指数明显升高,使荷瘤鼠脾白髓相对面积及脾小体个数明显增加。③香菇多糖使末梢血中性幼稚细胞比例明显增加。结论香菇多糖能使荷瘤鼠免疫细胞数量增加,明显延长腹水型S180小鼠的生存期。
【关键词】 香菇多糖; S180; 生存率; 体视学; 白细胞分类计数
Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of lentina on immunocyte and survival rate in S180 tumor-bearing mice. Methods70 mice al saline control group,tumor saline control Ⅰgroup,tumor saline controlⅡ group, tumor lentinan Ⅰgroup,tumor lentinanⅡgroup,survive model group and survive lentinan group. Evaluation of the experimental result included the general condition of the mice, inhibitory rate of S180 tumor, survival, changes in body or or index, spleen ber and ice obviously.2. Spleen indexes ber or lentinan group than others. 3.Immature neutrophil ratio in tumor lentinan group increased. ConclusionLentina can stimulate immunocyte propagating and prolong life of tumor-bearing mice obviously.
Key pus显微镜。SPSS14.0统计软件包。
2 方法
2.1 荷瘤S180鼠模型的建立取已接种7 d肿瘤生长良好的S180腹水型小鼠,抽吸乳白色的浓稠腹水以无菌生理盐水稀释后,用血球计数板进行活细胞计数,调整细胞数为1×107,制成肿瘤细胞悬液(活细胞率﹥95%)。在小鼠右前腋皮下注射0.2 ml S180细胞悬液,制成实体瘤模型。
2.2 动物分组及处理昆明小鼠70只,随机分为7组,雌雄各半,后两组用作生存率实验。第1组为正常盐水对照组,右前腋皮下注射0.2 ml生理盐水,7 d后处死;第2组为肿瘤模型Ⅰ组,第3组为肿瘤模型Ⅱ组,第4组为香菇多糖实验Ⅰ组,第5组为香菇多糖实验Ⅱ组,这4组于接种肿瘤后第2天始分别隔日腹腔注射生理盐水0.2 ml和香菇多糖0.2 ml(每只每次0.025 mg),第2,4组腹腔注射3次,第3,5组腹腔注射7次,均于最后1次给药后第2日处死;第6,7组处理方法分别同第3,5组,但7次腹腔注射后不处死,继续按常规饲养,并每日观察记录一般情况。
2.3 取材小鼠2%戊巴比妥钠全身麻醉,称重后剪开颈部皮肤,注射器穿刺颈内静脉取血,分别置抗凝管中和作二张血涂片;开胸,从左心室灌注生理盐水,至右心房流出清亮液体后改用4%多聚甲醛溶液灌注固定,迅速剥离肿瘤并取脾, 电子 天平称重后记录。然后按每只小鼠的不同编号分别入4%多聚甲醛溶液中后固定。血涂片 自然 风干后,甲醇固定,瑞氏染液染色待检。
2.4 检测指标
2.4.1 生存质量和寿命延长率每日观察记录生存实验各组小鼠的一般情况和肿瘤生长情况。寿命延长率=(给药组平均生存时间-模型组平均生存时间)/ 模型组平均生存时间。
2.4.2 脾重及脾指数,肿瘤重、肿瘤指数及抑瘤率计算公式:脾指数(mg/g)= 脾体质量(mg)/小鼠体质量(g);肿瘤指数(mg/g)= 肿瘤体质量(mg)/小鼠体质量(g);抑瘤率(%)=(肿瘤模型组肿瘤平均体质量-给药组肿瘤平均体质量)/ 肿瘤模型组肿瘤平均体质量×100%。
2.4.3 脾白髓相对面积及脾单位面积中脾
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