香附5种方法提取液对兔离体肠平滑肌的影响.docVIP

　　香附5种方法提取液对兔离体肠平滑肌的影响 作者：李超，孙秀梅，张兆旺，李军伟，于定荣，窦锦明 【摘要】 目的比较香附经二氧化碳超临界流体萃取（SFE-CO2）后药渣的5种方法提取液（SBE液、ethodsThe contractive amplitude, frequency, and tension of the normal and acetylcholine-induced rabbit intestine smooth muscle ental system.ResultsRhizoma Cyperi drug extracts could significantly reduce the frequency and tension of the normal rabbit intestine smooth muscle(Plt;0.05), depress the contractive amplitude and tension of intestine smooth muscle after acetylcholine induced hyperkinesias(Plt;0.01),in a Cyperi drug extracts can restrain the movement of rabbit intestine smooth muscle in vitro, and the effect of SBE group is the greatest than the other four groups. 　　Key a Cyperi drugs after SFE-CO2; 5 kinds of methods extracts; Rabbit ex vivo intestine smooth muscle 　　香附为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎，主产于山东、浙江、湖南、河南等地。本品有行气解郁，调经止痛之功效，用于 治疗 肝郁气滞，胸、胁、脘腹胀痛，消化不良，胸脘痞闷，寒疝腹痛，乳房胀痛，月经不调，经闭痛经等症［1］。李时珍称其为“气病之总司，女科之主帅”。 现代 研究表明，香附具有解痉作用，能治疗胃腹疼痛或胸腹痛［2］。香附水提液能明显抑制离体兔肠平滑肌的收缩幅度与频率，同时也能拮抗乙酰胆碱和氯化钡所致离体肠管平滑肌的兴奋作用［3］。为优选香附经二氧化碳超临界流体萃取（SFE-CO2）后药渣的提取方法和提取工艺，本文在对香附5种方法提取液（SBE液、gSO4·7H2O（开原化学试剂厂，批号：990201），NaH2PO4·2H2O（天津市科密欧化学试剂开发中心，批号：030828），皆为分析纯。 　　香附饮片系莎草科植物莎草Cyperus rotundas L.的干燥根茎，在安徽沪谯中药饮片厂，经炮制规范化研究加工成的规范饮片，用SFE-CO2萃取后药渣备用。 　　1.2 动物新西兰大白兔，雌雄不限，体质量（2.2±0.5）kg，由山东中医药大学动物室提供，合格证号：SCXK(鲁 　　1.3 供试液的制备 　　1.3.1 半仿生提取液的制备准确称取超临界提取后的香附药渣100 g，加水提取3次，加水量依次为香附的10倍，6倍，6倍；水的pH依次为2.0，6.5，9.0；煎煮时间依次为2，1，1 h；3煎液分别离心，合并上清液，浓缩并定容至200 ml，即得SBE液（香附药渣的质量浓度为0.5g·L-1）。 　　1.3.2 水提取液的制备按“1.3.1”项下方法，只将3煎用水改为常水（pH=7.0），依法操作，即得gSO4·7H2O 0.26g，NaH2PO4·2H2O 0.065g，NaHCO3 1g，CaCl2 0.2g，葡萄糖 1g，先将CaCl2用蒸馏水溶解完全，再加入其余6种物质溶解，转移至容量瓶中，用蒸馏水定容至1000 ml。 　 　2 方法与结果 　　2.1 对正常兔离体肠运动的影响［4，5］取禁食24 h家兔，用槌猛击其后枕部，使其暴死，迅速打开腹腔，找出胃和十二指肠交界处，用线结扎，在结扎线近胃侧剪断小肠，去除肠壁周围肠系膜，分离出长约20～30 cm的肠管，立刻置于4℃的台氏液中，剪成2～3 cm的肠段，并用台氏液把肠内容物冲洗干净，以备用。 　　打开BL-420E+生物机能实验系统，调零，定标，安装拉力换能器，设置参数为：增益调节G=50，时间常数T﹦DC，滤波调节F﹦30 Hz，扫描速度S﹦16.00 s/div。 　　取标本，两端对角穿线，将其放在盛有50ml台氏液的恒温浴管（温度保持为37℃）中，上端连接拉力换能器，下端系于L型钩上固定，同时每分钟通入混合气60～80个气泡。标本负荷1