一种新型贻贝抗菌肽的分离纯化及鉴定.pdfVIP

第??卷 第?期? 水 生 生 物 学 报? ???．??。? ?．?? ?????? 年 ?月? ??????????????????????????? ? ??， ???????? ???：??．????／????．??? 一 种新 型贻 贝抗 菌肽 的分 离纯化及 鉴定? 孙敬敬? 刘慧慧? 周世权?? 王信超? 范美华? 申? 望? 廖?智? ??．浙 江 海 洋 学 院海 洋 科 学 学 院，海 洋 生 物 资 源及 分 子 工 程 实 验 室，舟 山 ??????；? ?．舟 山医院?中科院北京基 因组研究所免疫基因组 学联合实验室，舟山 ???????? 摘 要：厚 壳贻 贝?????????????????广泛 分布 于我 国东 部海 域，其 体 内富含 各种抗 菌 肽分 子，是 研究 软体 动物? 免 疫 防御 机 制 以及开 发抗 菌 肽来 源 的新型 生物 抗生 素 的重要 对象 。采 用多 步反 相高 效液 相色 谱对 厚壳贻 贝? 血 清进行 分离 纯化 ，获得 一种 分子 量为 ????．????的具有 抗菌 活性 的多肽成 分 ；经多 肽 ?端测 序和基 因克 隆，? 结果 表 明该 抗 菌肽 由 ??个氨基 酸残 基构 成，含 ?个 半胱 氨酸并 形成 三对二 硫键 。结构域 分析 表 明该抗菌 肽? 具有 几丁 质结合 结构 域???????—??????????????，因此将该 抗菌 肽命 名为 ??????????．?。??????????—? 对革 兰 氏? 阳 性 菌 具 有 较 强 的 抑 制 作 用 ，同时 对 真 菌 及 革 兰 氏 阴 性 菌 也具 有 抑制 作用 。荧 光 定 量 ??? 检 测 表 明 ，? ??????????．?主要 在厚 壳贻 贝 的性腺组 织 中表达 且在 细菌诱 导后 ???其 表达量 达 到峰值 。研究 为深入 了解 厚? 壳 贻贝 抗菌肽 的分 子多样 性及 免疫 机制 奠定 了基 础 。? 关键 词：厚壳 贻 贝；抗 菌肽 ；几 丁质结 合结 构域 ；荧 光定量 ???? 中 图分 类号 ：????? 文献 标识 码：?? 文 章编号 ：?????????????????—???????? 抗 菌 肽 是 一 类 具 有 抗 菌 活 性 的 多 肽 类 分 子 ，? 位 。贻贝属 于软体 动物 门，双 壳纲 ，贻 贝科 ；贻 贝缺? 分 子 量 通 常小 于 ?????，由??— ??个 氨 基 酸残 基 组? 乏特 异 性免 疫 系统 ，其免 疫 防御 手段 主要 依赖 于 体? 成 【?’?。抗 菌肽是 生物 抵御 外界 环境 微生 物的入 侵 的? 内各 种类 型 的抗菌 肽分 子 。贻贝 抗菌肽 历来 是海 洋? 重要 手 段 ，也 是 目前 新 型生物 抗 生 素研 发 的候选 分? 生物 抗 菌肽 研究 中的一个 重 要对 象 ，也是 目前 海 洋? 子 。目前 ，人们 分别从 植 物 ???、无 脊椎 动 物?】和脊 椎? 生物 抗菌 肽研究 中发 现抗 菌肽 家族 种类 最多 的物种? 动 物 【??的不 同类 型组 织 和细胞 中分离 到 为数 众 多 的?