嗜热内切-β-1，4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达.pdfVIP

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2017-04-26 发布于未知
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嗜热内切-β-1，4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达.pdf

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第 ??卷第 ?期? 天津理工大学学报? ???．?????．?? ????年 ?月? ????????????? ???????眦 ?? ?????????????????? ???．????? 文章编号：????—????????????—????—?? 嗜热内切 ??·?，?一葡聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达? 郑春阳，柳晓瑜，王? 巍? ?天津强微特生物科技有限公司，天津 ???????? 摘要：首先通过引物设计扩增嗜热内切一口一?，?一葡聚糖酶基因，然后采用 ????和 ????双酶切目的基因与载体? ???????— ?，通过 ??连接酶连接后转化 ?????菌株，挑取阳性克隆进行测序，测序正确阳性克隆放大培养，大量提取? 质粒，并采用限制性内切酶 ?????线性化质粒，电转化感受态酵母细胞，经培养后挑选转化子分别对应点种到 ??、? ??平板，并利用 ???????获得多拷贝重组子，最后经甲醇诱导，并于??、????取样，经 ???— ????分析，结果表明整? 合嗜热内切一?一?，?一葡聚糖酶的毕赤酶母工程茵株构建成功．? 关键词：毕赤酵母；内切一? 一?，?一葡聚糖酶；分泌表达；双酶切；甲醇诱导? 中图分类号：????．??? 文献标识码：?? ???：??．????／?．????．????·????．????．??．???? ????????????????????? ???????????????????????????????????? ??????????????????? ????????????一? 一?，?