人牙周膜干细胞成骨分化前后miRNA表达谱差异分析.pdfVIP

148 ChineseJournalofPracticalStomatology Mar.2013Vol.6No.3 论 著 人牙周膜干细胞成骨分化前后miRNA 表达谱差异分析 章 燕 ，甄 蕾 ，郭姜莉1 2 2 文章编号：1674 - 1595 （2013）03 - 0148 - 05 中图分类号：Ｒ78 文献标志码：Ａ 摘要：目的 探讨人牙周膜干细胞（periodontalligamentstemcells，PDLSCs）成骨分化过程中miRNA表达谱的变 化，以期为揭示PDLSCs成骨分化的分子机制提供基础。方法 本研究于2012年1—12月在同济大学口腔医学 院口腔生物医学及转化医学实验室、复旦大学公共实验平台完成。原代培养人PDLSCs，经流式细胞仪检测鉴定 其干细胞特性（表达干细胞表面标志物STRO-1）；体外诱导其往成骨方向分化，经茜素红S及碱性磷酸酶显色试 剂盒染色检测其成骨特性。再采用表达谱基因芯片，分析成骨诱导前后PDLSCs的miRNA表达，筛选出分化前后 差异表达的miRNA。结果 与未经成骨诱导的细胞相比，PDLSCs在成骨分化14d后，有11个miRNA的表达上 调，13个miRNA的表达下调。结论 PDLSCs具有成骨潜能，其成骨分化的机制可能与miRNA表达的改变有 关。 关键词：牙周膜干细胞；成骨分化；miRNA Variation analysis of miRNA expression during osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells ZHANGYan*，ZHENLei，GUOJiang-li.*DepartmentofOralandMaxillofacialSurgery，LaboratoryofOral BiomedicalScienceandTranslationalMedicine，SchoolandHospitalofStomatology，TongjiUniversity，Shanghai 200072，China Abstract ：Objective ToanalyzethedifferentialexpressionofmiRNAsin periodontalligamentstemcells （PDLSCs） andosteo-differentiatedPDLSCs.Methods PDLSCswereisolatedandcultivated.PDLSCsofpassage2wasplatedat densityof5×103/cm2.At80%confluence，themediumwaschangedtoaninducingmedium.After 14daysofinduc⁃ tion，theresultswereevaluatedbyAlizarinredSstaining、ALPactivitytestandmiRNAmicroarrays.Results PDLSCs werecultivatedanddifferentiatedinvitrowithactivefunction，whichweremanifestedbyAlizarinredSstainingand ALPactivitytest.miRNAmicroarraysrevealedthat 13 miRNAsweredownregulatedinosteo-differentiatedPDLSCs while 11miRNAswereupregulated. Conclusions PDLSCshavethepotentialtodifferentiateintoosteoblasts.miRNA mayplayanimportantroleintheosteogenicdifferentiationofperiodontalligamentstemcells. Keywords ：periodontalligamentstemcells；osteogenicdifferentiation；miRNA 牙周膜干细胞（periodontalligamentstemcells， 重要作用。而小分子RNA（miRNA）被认为在调控 PDLSCs）是牙周膜固有细胞成分中的未分化间充