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专题17基因工程和细胞工程-高考生物备考学易黄金易错点Word版含解析
1.中美研究人员发现了PYL9蛋白(一种提高植物抗旱性的蛋白),利用转基因技术让水稻自身产生大量PYL9蛋白,可显著提高其抗旱性。请回答下列问题:
(1)已知PYL9蛋白的氨基酸序列,培育转基因抗旱水稻可用________的方法来获得目的基因。构建基因表达载体用到的工具酶是________________。
(2)导入目的基因的重组细胞可通过________________技术培育成完整植株,这一过程体现了______________。
(3)目的基因若在水稻细胞中表达,遗传信息流向是__________________;检测水稻细胞中是否存在PYL9蛋白,在分子水平上采用的方法是____________。
(4)经研究发现PYL9蛋白是位于细胞膜上的一种脱落酸受体。干旱环境中水稻老叶内脱落酸的含量增加,能加速________________,将节省的水分和养料转移到幼叶和芽中,增强了幼叶和芽的存活率。PYL9蛋白的作用能体现细胞膜____________________的功能。
(3)目的基因在水稻细胞中表达时,遗传信息流向是:从目的基因转录形成 mRNA,再经过翻译流向蛋白质。要检测蛋白质是否表达应采用抗原—抗体杂交,如果出现杂交带,说明表达成功。
(4)脱落酸含量增加能促进衰老叶片的衰老与脱落,将节省的水分和养料转移到幼叶和芽中,增强了幼叶和芽的存活率。该蛋白是受体,能识别信息,所以体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能。
【答案】 (1)人工合成 限制性核酸内切酶(限制酶)和DNA连接酶 (2)植物组织培养 植物细胞的全能性 (3)目的基因→mRNA→蛋白质 抗原—抗体杂交 (4)老叶的衰老与脱落 进行细胞间的信息交流
2.苦荞是一种有名的经济植物,其含有的黄酮类化合物具有降血糖、血脂等功效。CHS是合成黄酮类化合物的关键酶。有人把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中,培育高产黄酮苦荞品系。按图示回答:
(1)过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒的酶称为________。这种酶主要有两类,一类是从T4噬菌体中分离得到的,另一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为________。这两类酶都能恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的________键。
(2)图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞的方法称为________,除此外还可以利用的方法有____________________。对过程②操作前,需先用Ca2+处理农杆菌,使其成为________细胞。
(3)检测转基因苦荞培育是否成功,不能用抗原—抗体杂交技术进行检测的原因是________________________________________________, 可以比较转基因苦荞与普通苦荞的________含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定。
(3)转基因苦荞与普通苦荞植株中均含有黄酮类化合物,用抗原—抗体杂交,无法检测转基因苦荞是否培育成功。可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物的含量或细胞中CHS的含量进行判断。
【答案】 (1)DNA 连接酶 E.coliDNA连接酶 磷酸二酯 (2)农杆菌转化法 基因枪法、花粉管通道法 感受态 (3)转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物 黄酮类化合物
3.RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示:
(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、________、________和引物A等。
(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃,其目的是__________________________,该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受________ ℃。
(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要________个引物B。
(4)利用RT-PCR技术获取的目的基因________(填“能”或“不能”)在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是
_____________________________________________________________。
(5)RT-PCR过程中主要借助对________的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应有序高效地进行。
(4)利用RT-PCR技术获取的目的基因能在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度),便于检测。(5)RT-PCR过程中主要借助对温度的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应有序高效地进行。
【答案】 (1)RNA提取物 逆转录酶 (2)让逆转录酶变性失活、使mRNA-cDNA杂合双链解开 95 (3)2n-1 (4)
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