一轮复习生物课件--动物细胞融合与单克隆抗体（共27张PPT）.pptVIP

要从动物血清分离，没那么多血清，。。。得到的抗体不是一种抗体，而是针对一种抗原 的多种抗体 。。。4个代表抗原表面的化学结构，把称抗原决定、、把抗原注射到体内之后，就会有多种B淋巴细胞来识别，分别识别4个抗原决定。。。4个B活化后，产生4种抗体，能特异性与。。。动物血清分离的抗体是针对这种抗原的多种抗体。 这个B。。只产生这种抗体，如果把B大量增殖，形成细胞群，培养它，就能产生大量的这种抗体，但实际上这单个B在体外培养，但一段时间之后，它就死亡了，是不分裂的。B淋巴细胞体外培养，不能连续分裂， 前面讲过，有一种细胞可以无限分裂的，是癌细胞。前面刚讲过动物细胞融合，B能产生抗体，但不能无限增殖，但癌细胞可以无限增殖， 给小注射一定的抗原，从小脾脏中可以分离出B，B不只一种，针对这种抗原，小体内会产生多种活化的B。。另一边是取小的。。。培养，，接着加入促融剂，如PEG，促进它们融合，有的没融合，融合的也有多种情况，选出杂交瘤细胞，由于B有多种，杂交，，也有多种，筛选，，杂，，需要的是其中一种，怎么筛选？要进行专一抗体检验。。。再进行。。。选择阳性孔，经过多次克隆，阳性孔里面含有需要的杂，，，比较多，。。得到所需要的杂交，，怎么得到单克隆抗体，2个途径，，，体外培养，从培养液中提取，另外叫体内，，将细胞注射到小的腹腔内，将来从小的腹水中提取 杂交培养液加入到多孔，，检验，，用最开始给小注射的特定的抗原，再检验孔里面是否有相应的抗体，通过一定的指示可以，，，同时可能含有其他的杂，，，这样的孔叫阳性孔，把杂交拿出来再进行培养，就叫克隆化 理论上是一个，当然也有可能是2或3 经过前面2次克隆化和专一性，，，阳性孔，如果需要的是3，，选出来的既有，，，最终目的是为了获得单个3形成的细胞群，这个步骤是有限，，，法，理论上每个孔是1 个细胞，也有可能，，，克隆之后有3个孔含3，但只有2个孔是合格的，可多做几次，实现单个杂，，的克隆，称单克隆，这个阳性孔之后产生的抗体就是单克隆抗体。特异性非常强的一种抗体。 有限，，理论上一个孔只加一个细胞，但课本 上这一步之前还进行两次克隆化和阳性筛选，因为实际上经过诱导融合，再经过选择培养基，需要那种杂交 。。数量非常少，为了保证孔里面会出现需要的。 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 温故而知新——植物细胞杂交 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 植物细胞的融合 杂种细胞AB 杂种植株 脱分化 愈伤组织 再分化 植物组织培养 原生质体B 原生质体A 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 植物细胞A 植物细胞B 一、动物细胞融合 一、动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 2、动物细胞融合基本原理： 与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性 3、诱导方式 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激、振动、离心 聚乙二醇（PEG） 例如：仙台病毒 （丧失感染性、保留抗原结构） 思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞。 ５、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞融合的方法 诱导方法 用途 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 ６、动物细胞融合技术的发展简史告诉我们：科学技术是不断发展的。那么，实现动物细胞融合有什么意义呢？ 打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； 广泛应用多个学科领域； 重要用途：利用杂交瘤技术，制备单克 隆抗体。 二、单克隆抗体的制备 思考 将抗原注入动物体，然后从动物血清中提取抗体 人们获得抗体的传统方法是? 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。 　1.B淋巴细胞受抗原刺激后，经过增殖和分化成为浆细胞可以产生特异性抗体。 　2.动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　3.但每一个效应Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。　 分析： B淋巴细胞与抗体的关系 二、单克隆抗体的制备 １、单克隆抗体（概念） 由单个B