2017届高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1.pptVIP

一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 析出含DNA的丝状物:向上述滤液缓缓加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向搅拌,出现丝状物,当丝状物不再增加时,停止加水(此时NaCl溶液浓度相当于物质的量浓度为0.14 mol/L) 过滤含DNA的丝状物:用多层纱布过滤,含DNA的丝状物留在纱布上 DNA的丝状物再溶解:再次用物质的量浓度为2 mol/L 的NaCl溶液溶解DNA的丝状物 提取含杂质较少的DNA:向上述滤液中加入等体积的体积分数为95%的冷却酒精溶液,静置2~3 min,溶液中出现白色丝状物,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸去上面的水分 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 2.DNA的鉴定 实验原理 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 【例2】 下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是(　　) A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D.用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少 解析：洗涤剂能瓦解细胞膜,使DNA从细胞中释放出来,但是不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。将DNA丝状物溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,然后放入二苯胺试剂,沸水浴后冷却可观察到蓝色出现。“DNA析出”的步骤中,必须用玻璃棒缓缓搅拌使DNA聚集,防止DNA在搅拌的过程中断裂而使DNA获得量减少。 答案：C 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 目标导航 预习导引 目标导航 预习导引 一 二 一、提取DNA的方法 1.基本思路:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 2.DNA的理化性质 目标导航 预习导引 一 二 3.DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色。 DNA在不同浓度的NaCl溶液中析出与溶解过程是否属于变性?为什么? 提示：不属于。析出与溶解只是DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度发生改变,使得处于溶解状态的DNA分子出现量的差异过程的体现,该过程对DNA分子的结构没有任何影响,不属于变性。 目标导航 预习导引 一 二 二、DNA粗提取与鉴定实验设计 1.过程 (2)破碎细胞,获取含DNA的滤液 ①动物细胞的破碎(以鸡血为例):在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液。 ②植物细胞的破碎:(以洋葱为例)先将洋葱切碎,加入一定量的洗涤剂和食盐,充分搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。 目标导航 预习导引 一 二 (3)去除滤液中的杂质 方案一:通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。 方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,其中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 方案三:将滤液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min。? (4)DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于酒精溶液这一原理,可从溶液中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为白色丝状物。 (5)DNA的鉴定 将呈白色丝状物的DNA溶解于5 mL物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,再加入4 mL的二苯胺试剂,沸水中加热5 min,冷却后观察溶液颜色,注意要同时设置对照实验。? 目标导航 预习导引 一 二 2.操作提示 (1)防止血液凝固:每100 mL血液需加入3 g柠檬酸钠。 (2)减少产生泡沫:加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和。 (3)避免DNA断裂:加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓。 (4)二苯胺试剂要现配现用。 目标导航 预习导引 一 二 (1)你能总结一下DNA、RNA在细胞中的分布规律吗? 提示：对真核生物而言,DNA主要存在于细胞核(染色质)中,线粒体、叶绿体中也有少量的DNA。RNA主要存在于细胞质(细胞质基质、核糖体、叶绿体、线粒体)中。 (2)你能列举不能用来提取DNA的细胞吗?请给出必要的解释。 提示：哺乳动物成熟的红细胞、植物的筛管细胞等,因为它们失去了细胞核,而DNA分子主要存在于细胞核中。 (3)观察DNA、RNA在细胞中分布实验的原理是什么? 提示：用吡罗红甲基绿的混合染色剂对细胞染色,然后用显微镜观察。绿色区域代表DNA的分布区域,红色区域代表RNA的分布区域。 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 一、提取DNA的方法和原理 1.DNA粗提取的思路 利用DNA与RNA