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大黄药材及其制剂药效成分探析 　　摘 要：目的：以正交实验考察多种因素对大黄蒽醌类提取率的实际影响，并建立大黄标准曲线，并选取适当的方式对项目进行考察，为后续实验测定提供计算依据。以一测多评法对大黄及其提取物与制剂中的蒽醌类含量进行准确测定，以加强大黄质量控制。方法：在大黄提取实验中，以大黄恩论提取率为基本指标，运用正交设计表以及效应曲线图等对大黄酚及大黄素的提取率进行分析，对所获取数据结构进行统计分析，以明确最佳提取工艺。以一测多评法计算大黄药材含量，采用相对保留值方法对不同成分色谱峰进行准确定位。测定所制备的大黄药材及大黄药渣等样品中总蒽醌的含量，并加以对比分析。结果：由实验可知，蒽醌类最佳提取工艺为：10倍60%乙醇，提取3次，每次1小时。一测多评法在实验中具有良好的重复性和精准度，大黄总蒽醌提取率约为43%，大黄药材喷雾得粉率与实验室小试27%相比，实际得率不高，中试为21.4%。结论：由试验结果可知，正交实验设计具有均匀可比性，以一测多评法能够对大黄及其制剂中蒽醌类成分开展可靠的质量评价，更具快速性和便捷性，并且大黄蒽醌类的醇提方式在大生产工艺中具有一定可行性。 　　关键词：大黄药材；制剂；药效成分；含量；大黄蒽醌 　　中医领域内对大黄药材及其制剂的研究比较成熟，通过对蒽醌类成分的合理应用，促进了降糖脂片和清热通腑核心方两种制剂的形成。研究发现，对大黄药材进行多成分含量测定，能够对各环节进行质量控制，从而保证大黄药材及其制剂的生产质量。本文以正交实验方式考察乙醇浓度、乙醇用量以及提取时间等因素对大荒药材提取率的影响，建立大黄的标准曲线及相关方式，应用一测多评法对大黄药材进行含量测定，进一步分析其制剂药效成分，以准确把握不同处理样品中大黄蒽醌的含量差异，以加强大黄药材的质量控制。 　　1 大黄提取工艺研究 　　1.1 仪器与试药 　　本次实验研究中，以高效液相色谱仪、超声清洗器、调湿电热套以及电子分析天平作为主要实验仪器；选用国药集团的硫酸试剂，选用购自背景同仁堂的大黄药材，水位超纯水，其余试剂为分析纯。 　　1.2 方法和结果 　　1.2.1 实验方法 　　在本次实验研究中，在AgilentHC-C18色谱柱和保护柱条件下，以甲醇：0.1%磷酸水溶液为流动相，柱温为25℃，检测波长为254nm，进样量为5μl。 　　精密称取适量大黄素、大黄酸、大黄酚等对照品适量，以甲醇进行溶解定容，配制成标准浓度的对照品溶液。精密称取大黄药材饮片50g，置于容器内，并加入适量乙醇，加热回流一定时间后放冷，待超声处理后，加入三氯甲烷，回流放冷后置于分液漏斗中，分区三氯甲烷层，以酸液提取三次，合并三氯甲烷液后，减压回收溶剂，以甲醇对其残渣进行定容。 　　在此基础上，按照标准方式制备大黄供试品，在一定色谱条件下，对大黄蒽醌类物质的含量进行准确测定，记录其峰面积，并按照标准曲线方程计算器含量，符合中国药店2010部相关要求。 　　1.2.2 多因素考察 　　在溶剂考察方面，以乙醇作为提取溶剂，考察乙醇浓度、乙醇用量以及提取时间及提取次数对大黄中大黄酚、大黄素等转移率的影响。在正交试验考察方面，将影响转移率的多个因子进行正交优化设计，能够在一定程度上提高大黄蒽醌类成分的提取率。研究表明，乙醇浓度、乙醇用量以及提取时间等均是影响中药化学物质提取率的重要因素。在本次实验研究中，以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间以及提取次数作为主要考察因素，作正交设计的极差分析，以优选大荒蒽醌类最佳提取工艺，具体因素水平如表1所示。 　　在查询统计表后，可以得出大黄酚正交极差分析的相关数据，以蒽醌类物质的转移率作为考察指标，其参数越大，表明蒽醌类提取物的效应越好。 　　通过正交结果分析可知，在大黄药材及其制剂中，影响五种蒽醌类物质提取率的最明显因素要数提取次数。研究表明，含量测定过程中，提取指标数值无线的陡峭程度与蒽醌类物质的提取率之间存在密切的联系，指标数值与提取率之间基本呈正相关关系，由此可知，大黄蒽醌类的最佳提取工艺为10倍量，浓度为60%乙醇，分别提取3次，每次1小时。 　　1.2.3 验证试验 　　结合实验相关标准，取一定量大黄药材后，依照上文研究中所得出的大荒蒽醌类物质最佳提取工艺，对大黄药材及其制剂中的蒽醌类物质进行规范提取，并依照实验标准制备样品，对样品含量进行测定。在这一过程中，应当严格依照系统适应性试验中的色谱方法开展具体的实验操作，以保证实验的精准度。在此基础上，将相关数据信息代入到标准曲线方程中，进行准确计算，最终得出大黄酚以及大黄素的相关数据结果。 　　1.3 讨论 　　正交实验设计具有一定可比性，均匀度较高，能够对实验各项因素之间进行科学化的对比分析。在本次实验研究中，相关人员决定采用正交设计方