剖析活血止痛胶囊对大鼠损伤的修复作用.docVIP

剖析活血止痛胶囊对大鼠损伤的修复作用 　　急性软组织损伤时肌肤瘀血停滞,可引起局部疼痛、肿胀,同时,血瘀致血流不畅、微循环紊乱,可见渗出、肿胀等表现。活血止痛胶囊具有消肿止痛、活血化瘀的功效,临床常用于肿痛瘀血、跌打损伤,痹痛风湿等症的治疗。本研究观察了活血止痛胶囊对大鼠急性软组织损伤的修复效果,为活血止痛胶囊的临床应用提供实验依据。 　　1 材料与仪器 　　1.1 实验动物 SPF级雄性SD 大鼠80只,体质量300~320g,由河北医科大学动物实验中心提供,动物合格证号:71043。人工光照,明暗周期为12h,湿度50.0%、室温22℃笼养,垫料每天更换1次。 　　1.2 药物与试剂 活血止痛胶囊(南京中山制药有限公司,批号0.25g/粒);云南白药胶囊(云南白药集团股份有限公司,批号0.25g/粒)。 　　1.3 主要仪器 自制软组织打击器(由1.0kg砝码、PVC圆管、硬质木板组成);LG-R-80F全自动血液黏度仪,AP-960全自动酶联免疫分析仪。鼠IL-1beta;、IL-6ELISA 试剂盒,均购自上海信帆生物科技有限公司。 　　2 方法 　　2.1 动物造模、分组与给药 大鼠右小腿脱毛后,对右小腿中部的直径进行测量,再予腹卧位固定,选择自由落体方式击打造模,打击部位为右小腿中部的外侧,1kg砝码10.0cm 高度,自由落体连续击打2次。将模型动物分为模型组(n=25)、云南白药胶囊阳性对照组(n=20)、活血止痛胶囊组(n=35)。模型组给予生理盐水,活血止痛胶囊组给予活血止痛胶囊,云南白药胶囊组给予云南白药胶囊,在造模后1h给予相应药物,云南白药胶囊与活血止痛胶囊均以生理盐水调成5mg/mL 的混悬液,各组给药体积均为4mL/kg,2次/d,共给药5d。 　　2.2 观察指标及测定方法 测量3组大鼠造模前、给药后不同时间点的损伤肿胀值、软组织损伤评分、瘀斑面积,末次给药后1h乙醚麻醉大鼠,取腹主静脉血于肝素抗凝采血管和普通非抗凝采血管,分别进行血流变指标、血清IL-1beta; 和IL-6的测定。处死大鼠,取软组织损伤组织进行炎性细胞浸润程度测定。 　　2.2.1 损伤肿胀值的测定:采用游标卡尺测量造模前及给药后2、24、48h时右小腿中部的直径,并计算损伤肿胀值。损伤肿胀值=(服药后右小腿直径-造模前右小腿直径)服药前直径times;100%2.2.2 瘀斑面积的测定:采用游标卡尺测量造模前及给药后2、24、48h时右小腿瘀斑长径和短径,瘀斑面积为长径和短径的乘积。 　　2.2.3 软组织损伤评分:末次给药1h进行软组织损伤评分,评分标准如下:损伤局部完全恢复,同正常软组织计0分;局部轻微肿胀,表面无出血灶计1分;表面肿胀,可见有小块出血或瘀斑灶,面积0.5 cm2 左右计2分;表面明显皮下出血、瘀斑、水肿,面积2.5cm2 左右计3分;表面大面积出血、瘀斑、水肿,面积大于3.5cm2计4分。 N 　　2.2.4 血液流变学指标:末次给药1h时取腹主静脉血于肝素抗凝采血管中,采用LG-R-80F全自动血液黏度仪分析仪检测血液流变学各项指标,包括红细胞压积、全血黏度、血浆黏度、血浆纤维蛋白原、血小板聚集百分比。所有实验操作步骤严格按照说明书进行。 　　2.2.5 血清IL-1beta; 和IL-6的测定:将抽取的静脉血室温下静止30min,待血液完全凝固后离心分离得血清。在AP-960全自动酶联免疫分析仪上采用ELISA法测定血清IL-1beta;、IL-6水平,所有实验操作步骤严格按照说明书进行。 　　2.2.6 炎细胞浸润程度:取造模部组织样本常规脱水、石蜡包埋切片,HE 染色,在显微镜下进行嗜中性粒细胞计数。 　　2.3 统计学处理 采用SPSS19.0软件对数据予以统计处理,其中计量资料以