关于子宫颈液基细胞蜡块的制作方法　.docVIP

关于子宫颈液基细胞蜡块的制作方法　 　　近年来，由于细胞蜡块的出现在一定程度上缓解了细胞涂片诊断的压力，其诸多优点也在病理诊断上显现其可行性。目前，胸腹水细胞蜡块制作技术已较为成熟，而妇科液基细胞标本的细胞蜡块制作方法报道较少。本实验通过病理科常用设备包埋框和琼脂制作针对子宫颈液基细胞标本的细胞蜡块取得较好效果，现介绍如下。 　　1　材料与方法 　　1.1　材料 　　收集宁波市北仑区第二人民医院病理科2014年9月～2014年12月送检的宫颈液基薄层细胞学检测阳性标本20例。 　　1.2　方法 　　(1)将液基保存瓶中的剩余液体倒入事前已做过液基薄层细胞学检测的离心管中，2000r/min离心10min，用吸管吸去大部分液体，余下高于沉渣1～2cm的液体。(2)用10ml的塑料吸管取60℃ 3%琼脂一滴，滴于胃镜包埋框的小槽内，使其铺满胃镜包埋框小槽底部，并放于60℃温箱2min。(3)用吸管将离心管内的沉渣与液体混匀，并吸至胃镜包埋框的小槽内，放于温箱4min。(4)细胞沉渣平面由原来的凸面转变为凹面时，在胃镜包埋框的小槽内滴加琼脂，直至覆盖沉渣表面少许即可，再次放入温箱2min。(5)将包埋框置于冰箱冷冻仓内3min。(6)将沉淀物取出，用包埋纸包好，按常规石蜡包埋制备蜡块。 　　2　结果 　　此方法制作完成的蜡块，经常规制成切片染色后，肿瘤细胞聚集，结构清晰，核质染色对比度好，色彩鲜艳，形态完整。 　　3　讨论 　　宫颈液基细胞标本所制成的细胞蜡块，因没有胸腹水中纤维素网罗，所以常常松散，不易聚集，本实验采用的小号胃镜包埋框，其内槽大小1cmtimes;1cm，通过此包埋框内槽将妇科细胞收集起来，可有效地将更多采集的细胞纳入观察范围，在一定程度上恢复了组织结构。 　　此操作过程中，先往包埋框内滴加一滴琼脂，使包埋框内有一层液体铺垫，再取细胞蜡块时框内不会出现细胞沉渣残留。第1次放温箱是为了加热包埋框，使琼脂不凝结成块;第2次放温箱是为了蒸发大部分液基保存瓶内的固定液，使细胞尽可能下沉，不会悬浮在固定液中;第3次放温箱是为了让沉渣细胞沉淀在包埋框内槽的底部，并能与琼脂充分融合。 　　包埋框中细胞蜡块制作法的操作重点在于将细胞沉渣放于包埋框的小槽内，其沉渣液中不可混入太多固定液。因为混入过多固定液的沉渣易漂浮于包埋框小槽外，使细胞不能很好的聚集;但固定液也不可太少，否则难以被吸管吸出。经反复试验，发现离心后留取1～2cfhOFgm的固定液较为合适。若遇到沉渣较多的情况，可灵活采用比胃镜包埋框大一号的包埋框进行处理。 　　传统的琼脂包埋法是在离心后的试管内滴加琼脂，在滴加过程中细胞沉渣常常被冲散开，在倒扣试管取琼脂细胞混合物时易出现琼脂分裂的现象，还需用刀修整，极为不便。液基保存瓶内的固定液大部分的成分是水和乙醇，遇热易蒸发或挥发。本实验中将沉渣细胞固定在一个很小的范围内，蒸发一部分固定液，有效保证3%琼脂的浓度，更利于细胞与琼脂的有效结合。细胞沉渣处于60℃的温箱内，因其前期已在液基保存瓶中充分固定，不易造成细胞蜕变等现象。用包埋框制作细胞蜡块除了细胞蜡块面积小，其材质也利于细胞蜡块速冻，且取材方便，每个病理科均具备该条件。 　　宫颈液基细胞蜡块的出现有效解决了液基薄层细胞学检测或妇科宫颈涂片检查时制片出现的细胞成团重叠、肿瘤细胞少、无组织结构等问题。其可以反复切片进行免疫组化、HPV分子病理学检查，大大减轻了患者再次取材的经济压力和精神压力;并可以长期保存，进一步满足临床病理诊断需求。因此，包埋框细胞蜡块制作法取材便利、操作便捷、效果显著，值得推广。